Định lượng Billirubin trực tiếp:

Một phần của tài liệu BÁO cáo CUỐI kỳ môn THỰC HÀNH hóa SINH phương pháp đo quang phương pháp đo quang (Trang 86 - 91)

Tổng quát:

• Xác định căn nguyên là do tan máu hay do tạo hồng cẩu khơng hiệu quả

• Trong thăm dị các tắc mật (trong và ngồi gan): nồng độ bilirubin toàn tăng > 40 mg / dL chỉ dẫn tình trạng tắc nghẽn ở mức độ tế bào gan

• Đánh giá mức độ tăng thành phần bilirubun trực tiếp hay gián tiếp có thể gợi ý các chẩn đốn:

o Khi tăng bilirubin trực tiếp và chiếm 20 - 40% bilirubin toàn phần: gợi ý nhiều cho vàng da nguyên nhân tại gan hơn lànguyên

nhân sau gan.

o Khi tăng bilirubin trực tiếp và chiếm 40 - 60% bilirubin toàn phần: gặp ở cả vàng da do nguyên nhân tại gan và saugan.

o Khi tăng bilirubin trực tiếp và chiếm >50% bilirubin toàn phần gợi ý nhiều cho vàng da do nguyên nhân sau gan

1. Nguyên tắc:

Cho Billurubin toàn phần tác dụng với DMSO (dimethyl sulfoxide) hoặc coffeine và diazotized sulfanic acid để hình thành azo màu đỏ. Bil trực tiếp (Slucuronized billirubin thuỷ phân) phản ứng trực tiếp không cần DMSO hay coffeine. Sự tăng độ hấp thụ của azo ở 546 nm bị tác động trực tiwwps bởi nồng độ bil trưc tiếp trong mẫu và đo bằng máy quang phổ

2. Nồng độ chỉ định:Thuốc thử A:Thuốc thử A:Thuốc thử A: Thuốc thử A:

Sulfanilic acid 29 mmol/l

HCl

Thuốc thử B:

3. Lưu trữ và bảo quản

Thuốc thử cịn ngun niêm phong sẽ có thể sử dụng đến hạn ghi trên nhãn nếu được bảo quản ở +2ođến +8oC. Thuốc thử A và C

có chứa Diazotized 2,4-dichloroaniline nên tránh ánh sáng 4. Mục đích sử dụng

Sử dụng trong phịng thí nghiệm định lượng Billirubon trong huyết thanh và huyết tương người 5. Lưu ý

Chỉ dùng cho các thí nghiệm chẩn đốn trong phịng thí nghiệm. Sử dụng các phương tiện bảo hộ trong khi dùng thuốc thử. Thuốc thử có chứa các chất gây kích thích. Khơng được ăn và tránh tiếp xúc với da và niêm mạc. Khi lỡ chạm phải rửa sạch vùng da đó với nước và can thiệp y tế khi chạm phải mắt, hít hay nuốt phải.

6. Giá trị kỳ vọng:

Lên đến 5.1 ựmol/1(0.3 mg/dl) 7. Thành phần mẫu thử:

Huyết thanh sạch và không tán huyết hoặc huyết tương với heparin hoặc EDTA bảo quản trong phòng tối và làm thử nghiệm ngay khi lấy mẫu

8. Độ tuyến tính:

Nồng độ tuyến tính là 8 mg/dl hoặc 137 pmol/1. Trong trường hợp cao hơn cần pha lỗng với nước mi sinh lý (0.9%) ở tỉ lệ 1/5 và nhân kết quả với 6

9. Chuyển đổi đơn vị: Mg/dl -> pmol/l. Hệ số 17.1

pmol/l -> mg/dl. Hệ số: 0.0585

10. Quy trình thử nghiệm:

-> Phương pháp đo điểm cuối hoá học - Bước sóng: 546 nm

- Nhiệt độ 25 độ C

Ống trắng Ống đo

Thuốc thử R1 1000 ịll 1000 ịll (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});

Thuốc thử R2 20 ịil

Huyết thanh 100 ịll 100 ịil

-> Trộn đều và ủ trong điều kiện không ánh sáng. Đo sự hấp thụ ánh sáng của ống đo A(sample) so với ống trắng A(B) sau đúng 5 phút

SA (S) — A(sample) — A(B)

ỖA (S) x 12.8

ỖA (S) x 219

-> Tán huyết có thể gây ảnh hưởng đến kết quả

Bil rất nhạy với ánh sáng nên q trình định tính cần diễn ra ngay khi lấy mẫu 11. Biện luận:

-> Triệu chứng liên quan đến tăng bilirubin có thể gồm vàng da - vàng của da và mắt, mệt mỏi, ngứa da, nước tiểu sậm màu và chán ăn.

Các trường hợp tăng Bil trực tiếp:

• Giảm bài tiết Bi TT vào trong các tiểu quản mật.

• Khi gan bị tổn thương, khả năng bài tiết Bi TT giảm nặng hơn nhiều so với khả năng kết hợp

• Khi khơng được bài tiết vào mật thì Bi TT sẽ quay ngược vào hệ tuần hoàn do5cơ chế sau:

o Vỡ các tiểu quản mật thứ phát do hoạt tử tế bào gan.

o Tắc các tiểu quản mật do tế bào gan phù nề gây chèn ép hoặc cô đặc mật.

o Tắc các tiểu quản mật trong gan do tế bào viêm.

o Thay đổi tính thấm của tế bào gan.

o Ứ đọng Bi TT trong tế bào gan, gây khuếch tán thứ phát vào huyết tương.

Mg/dl

pmol / 1

• Bệnh lý tế bào gan: viêm gan do virus, viêm gan do thuốc (INH, Rifampicin, Halothan, Methyldopa, Chlorpromazine, Paracetamol, Salicylat..., viêm gan nhiễm độc;

• Suy tim mất bù.

• Xơ gan, xơ gan mật tiên phát, viêm đường mật xơ hố

• Xâm nhiễm gan hoặc các tổn thương (ví dụ: bệnh lý khối u, di căn gan, bệnh Wilson, u hạt...).

Một phần của tài liệu BÁO cáo CUỐI kỳ môn THỰC HÀNH hóa SINH phương pháp đo quang phương pháp đo quang (Trang 86 - 91)