CHƯƠNG 3 : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.4 Xác định hiệu suất bao gói và khả năng phóng thích
3.4.1 Xác định hiệu suất bao gói bằng túi thẩm tách celluloseDung dịch sau khi lấy ra kh Dung dịch sau khi lấy ra kh
thấy rằng cường độ hấp thu tại b
năng xác định của đường chuẩn nồng độ. Do đó, để tăng tín hiệu đỉnh phổ tại b sóng 276nm, chúng tôi tăng n
Hình 3.12: Ảnh TEM của h PEG bọc insulin (b)
(a)
43 CBHD: PGS.TS Đ
ừ những kết quả thu nhận được, chúng tôi nhận xét rằng: hạt nano chitosan gắn PEG òn, đều. Dựa vào hình ảnh kích thước hạt chúng tôi nhận ấy rằng sự phân bố kích thước hạt khi chụp hình DLS và chụp TEM l
ạt chủ yếu phân bố ở khoảng 100nm, tương tự khi bọc insulin vào thì h ổi kích thước bao nhiêu, kích thước cũng chỉ phân bố khoảng tr
ấy rằng sự phân bố kích thước hạt trước hay sau khi ao nhiêu. Điều này chứng tỏ rằng lượng insulin được b
ữa, theo ảnh DLS ở hình 3.12a và 3.12b, chúng tôi thấy rằng độ rộng của sự ớc của hạt khi chưa bọc insulin là lớn hơn so với khi bọc
insulin, hạt có xu hướng tụ lại với nhau vì insulin là m ồng kềnh. Mặt khác, khi chưa bọc insulin thì hạt thu đ
ợc đẹp khi chụp ảnh TEM. Điều này là do hạt khi chưa bọc insulin là h ọc insulin, hạt lại có xu hướng bền, ít nhạy hơn nên h
ịnh hiệu suất bao gói và khả năng phóng thích ịnh hiệu suất bao gói bằng túi thẩm tách cellulose
hỏi túi thẩm tách sẽ được mang đi đo UV-Vis, k ờng độ hấp thu tại bước sóng 276nm rất yếu. Giá trị này n
ờng chuẩn nồng độ. Do đó, để tăng tín hiệu đỉnh phổ tại b sóng 276nm, chúng tôi tăng nồng độ Insulin trong mẫu. Một thể tích l
a hạt nano chitosao gắn PEG (a) và hạt chitosan gắn
(b)
CBHD: PGS.TS Đặng Mậu Chiến
ợc, chúng tôi nhận xét rằng: hạt nano chitosan gắn PEG ớc hạt chúng tôi nhận ụp TEM là tương đối insulin vào thì hạt ớc cũng chỉ phân bố khoảng trên ớc hay sau khi bọc insulin là bọc không được ấy rằng độ rộng của sự ọc insulin. Điều ì insulin là một ạt thu được không insulin là hạt tương đối ơn nên hình ảnh
Vis, kết quả nhận ày nằm dưới khả ờng chuẩn nồng độ. Do đó, để tăng tín hiệu đỉnh phổ tại bước ẫu. Một thể tích là 0,02 ml dung
dịch insulin 5mg/ml được pha v 49.505 µg/ml) sau đó mang đi đo UV
Tại bước sóng 276nm dung dịch có c
đường chuẩn nồng độ Insulin, chúng tôi suy ra đ là 49.8343µg/ml (hình 3.14). 0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 0.08 0.09 0 10 20 đ ộ h ấ p t h ụ Hình 3.13: Phổ UV-Vis c hiệu chỉnh nồng độ
Hình 3.14: Đồ thị nội suy giá tr
ợc pha vào 2 ml dung dịch mẫu ( nồng độ insulin th 49.505 µg/ml) sau đó mang đi đo UV-Vis trong vùng từ 200nm đến 400nm.
ớc sóng 276nm dung dịch có cường độ hấp thụ 0.05, từ giá trị n
ờng chuẩn nồng độ Insulin, chúng tôi suy ra được giá trị nồng độ của dung dịch mẫu 14).
20 30 40 50 60 70 80
Cinsulin(µg/ml)
(49.8343; 0.050935)
Vis của dung dịch ngoài túi thẩm tách trước và sau khi
i suy giá trị nồng độ Insulin trong dung dịch mẫu sau khi
ịch mẫu ( nồng độ insulin thêm vào đạt ừ 200nm đến 400nm.
ờng độ hấp thụ 0.05, từ giá trị này và đồ thị ợc giá trị nồng độ của dung dịch mẫu
90
Luận Văn Thạc Sĩ 45 CBHD: PGS.TS Đặng Mậu Chiến
Theo như quy trình pha mẫu, nồng độ insulin thêm vào là 49.505mg/ml, nên nồng độ insulin ban đầu khi chưa hiệu chỉnh là 0.0147µg/ml. Tổng thể tích môi trường dùng kiểm tra hiệu suất bao gói là 40ml, nên suy ra khối lượng insulin tự do là 0.588mg. Hay nói cách khác là có 0.588mg insulin tự do không kết hợp với hạt nano trong 3ml dung dịch hạt nano thu được. Vậy trong 10ml dung dịch hạt nano có 1.96mg insulin tự do. Với khối lượng tổng insulin sự dụng là 2mg, thì hiệu suất bao gói (EE) sẽ được tính theo công thức như sau:
Từ công thức trên, chúng tôi tính được EE=15%. Như vậy, nếu so với các công trình bao gói chỉ có chitosan thì hiệu suất bao gói của chúng tôi còn thấp so với khi không gắn PEG vào chitosan. Nhưng điều đó không nói lên là chúng tôi đã không thành công, mà điều này khẳng định được rằng việc gắn PEG lên chitosan rồi bọc insulin sẽ đảm bảo cho việc tải thuốc được tốt hơn.
3.4.2 Khả năng phóng thích insulin
Kết quả khả năng phóng thích insulin của hạt chitosan gắn PEG được đo trong 1 ngày và được trình bày qua hình. Theo kết quả thu được cho thấy insulin được phóng thích từ từ phù hợp với yêu cầu của 1 hệ dẫn thuốc cần chế tạo.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 0 5 10 15 20 25 in su lin đ ư ợ c p h ó n g t h íc h ( % )
thời gian (giờ)
KẾT LUẬN VÀ HƯỚNG PHÁT TRIỂN