CHƯƠNG 2 : THỰC NGHIỆM
2.2 Phương pháp
2.2.2.2 Giai đoạn 2
Giai đoạn 2 là phản ứng gắn PEG lên chitosan.
Bản thân nhóm amin của PEG không thể tự trực tiếp tạo ra phản ứng với Pha-cts, nên p- Toluenesulfony chloride(TsCl) được sử dụng với mục đích hoạt hóa nhóm amin của mPEG.
Phản ứng này được thực hiện như sau: Đầu tiên chúng tôi chuẩn bị dung dịch bao gồm chitosan pha trong dung môi Dichloromethane (DCM) khuấy ở nhiệt độ 0oC. Sau đó, chúng tôi nhỏ giọt đồng thời một lượng dung dịch bao gồmTsCl, Triethylamine (Et3N) trong dung môi DCM vào dung dịch chitosan đã được chuẩn bị sẵn. Vì TsCl sau phản ứng cho sản phẩm phụ là HCl nên Et3N được sử dụng để tạo ra điều kiện trung hòa cho phản ứng. Điều kiện phản ứng xảy ra ở nhiệt độ 0oC, khuấy mạnh qua đêm. Sản phẩm được sau phản ứng sẽ được lọc qua nước đá lạnh, nhằm loại bỏ hết các chất chưa phản ứng và các chất dư thừa trong phản ứng.
Sau khi thực hiện xong phản ứng hoạt hóa nhóm (-OH), phản ứng gắn PEG lên Pha-cts đã đủ điều kiện để thực hiện. Cho một lượng PEG cố định hòa tan trong thể tích DMF để đạt được tỉ lệ 1:1(w/w) với chitosan, đã được thêm vào sản phẩm đã thu được ở
Hình 2.1: Sơ đồ phản ứng bảo vệ nhóm chức amin
Hình 2.2: Phản ứng bảo vệ gốc amin
Phathalic anhydride(Ph.A) + Chitosan Pha-cts
DMF+ H2O 120OC,N2 + DMF+ H2O (Ph.A) (Chitosan) (Pha-cts) 120oC, N2
phản ứng hoạt hóa nhóm (-OH). Phản ứng này được thực hiện trong điều kiện nhiệt độ phòng thí nghiệm, khuấy đều, để qua đêm trong thời gian 5 ngày. Sau khi thực hiện xong phản ứng, sản phẩm được lọc diethyl ether để lọc hết các chất dư thừa. Sau khi thực hiện sấy khô chân không, sản phẩm thu được có dạng bột màu trắng, mịn.
Toàn bộ phản ứng gắn PEG lên Pha-cts được hiểu rõ hơn qua cơ chế phản ứng như sau: