CHƯƠNG 2 : THỰC NGHIỆM
2.2 Phương pháp
2.2.3.1 Chế tạo hạt nanochitosan gắn PEG
Đầu tiên, chitosan gắn PEG đ
dịch chitosan được khuấy đều trong 30 phút để trong dung dịch acid acetic
trong 1ml dung dịch acid acetic có nồng độ pH t chitosan gắn PEG. Dung dịch TPP đ
Hình 2.5: sơ đồ phản ứng h
Hình 2.6: Phản ứng hủ
NaBH4
Cts-PEG ( chưa h
Khuấy gia nhiệ
27 CBHD: PGS.TS Đ
ản ứng hủy bảo vệ gốc amin sẽ được hiểu rõ hơn qua cơ chế phản ứng nh
ế tạo hạt chitosan gắn PEG bọc insulin
ày, thí nghiệm được chia làm hai giai đoạn. Giai đoạn 1 l ợp hạt nano chitosan gắn PEG có kích thước khoảng dưới 300nm. Giai đoạn 2 l ện tổng hợp hạt chitosan gắn PEG bọc insulin với kích thước đã được tổng hợp.
ế tạo hạt nano chitosan gắn PEG
ắn PEG được hòa tan trong 9ml dung dịch acid acetic
ợc khuấy đều trong 30 phút để chitosan gắn mPEG hòa tan hoàn toàn ịch acid acetic 2%. Sodium Tripolyphosphate (TPP) cũng đ
ịch acid acetic có nồng độ pH tương ứng với môi trường pH h ắn PEG. Dung dịch TPP đã được chuẩn bị trước sẽ được nhỏ giọt từ từ với
ng hủy bảo vệ phản ứng gốc amin của chitosan
ủy bảo vệ gốc amin
2-propanol
PEG ( chưa hủy bảo vệ gốc amin)
Khuấy qua đêm, to phòng
Axit acetic ệt, 80oC, 2h Cts-PEG NaBH4 EtOH,80oC CBHD: PGS.TS Đặng Mậu Chiến ế phản ứng như sau: ạn. Giai đoạn 1 là tổng ới 300nm. Giai đoạn 2 là thực
ợc tổng hợp.
ịch acid acetic 2%. Dung hòa tan hoàn toàn ũng được hòa tan ờng pH hòa tan ợc nhỏ giọt từ từ với
tốc độ khuấy từ mạnh vào dung dịch chitosan gắn PEG đã hòa tan trước đó, để đạt tỉ lệ khối lượng giữa chitosan gắn PEG:TPP là 1:1, 2:1, 4:1. Hệ được khuấy mạnh trong quá trình nhỏ giọt. Sau khi kết thúc nhỏ giọt, hệ vẫn được tiếp tục khuấy mạnh và ổn định trong thời gian là 2 giờ.
Hạt nano hình thành là kết quả của sự tương tác tĩnh điện giữa nhóm amino tích điện dương trên chitosan và nhóm tích điện âm trên tác nhân liên kết TPP. Dung dịch hạt nano chitosan gắn PEG thu được, chúng tôi mang đi ly tâm ở 20000 vòng/ phút trong 60 phút, thu phần hạt lắng đọng phía dưới ống ly tâm, rửa hạt nhiều lần bằng nước DI. Sản phẩm được tái huyền phù trong nước và để đông cứng bằng tủ đông qua đêm. Sản phẩm sau khi đông lạnh sẽ mang đi đông khô thu hạt trong thời gian là 3 giờ.