Khuẩn lạc nhám (dạng R): bề mặt nhám xù xì, rìa nhọn hay có góc cạnh.

góccạnh.

Khuẩn lạc nhầy, khuânlạccon,khuẩn lạc mảng….

Vi sinh vật đại cương 9/12/2017

Một số loại môi trường rắn

97

Thạch máu (blood agar)

Casein media: chọn lọc

Protease/casease

MT chọn lọc: Salmonella agar) Môi trường thạch ống

Một số dạng khuẩn lạc của vsv

9/12/2017 TS. Nguyễn Thị Tuyết Lê 98

9/12/2017 TS. Nguyễn Thị Tuyết Lê 99

Rìa/ bờ viền Bề mặt

Môtả đặc điểm của khuẩn lạc

9/12/2017 TS. Nguyễn Thị Tuyết Lê 100

b. Môitrường dịch thể(lỏng)

• Là môi trường không bổ sung thêm

chất đông đặc(thạch)

• Đánhgiá sinhtrưởngqua các tiêu chí:

- Đếm số lượng tếbào

- Độ đục củamôitrường(so màu):đục

đềuhayở dạngbông,dạng vẩnmây

- Sự lắng căn hay kết tủa: dầy hay

mỏng,xốphaykết chặt,dạng hạthay keo - Hình thành màng: màng tròn hay màng kín,bề mặtmàng thô haymịn, dầyhaymỏng - Sinh khí

- Màu, mùicủamôitrường

MôitrườngTrypticase soy nuôicấyEnterobacter

Đục lắng

căn

9/12/2017 TS. Nguyễn Thị TuyếtLê 101

Mycobacterium Phle: cặn, màng, khôngđục

Phản ứnglên men đường

Đọc thêm: Môi trường bán rắnMôi trường có từ 0,2-0,7% thạch Môi trường có từ 0,2-0,7% thạch

Được sử dụng để quan sát khả năng di động của vsv

Vi sinh vật đại cương 9/12/2017

c.Một số phương pháp xác định số lượng vsv

Phươngphápđếm trực tiếp dướikínhhiểnvi:

 Sử dụng buồng đếm hồng cầu Neubauer

 Ứng dụngcho các vsv có kích thước lớn như nấmmen, vi tảo, vk lam đếmnhanh

 Nênsử dụngkínhhiểnvi phảnphađểtránhnhầm lẫn

103

Nhược điểm: không phânbiệt được các TB sốngvàchết; độchính xác không caovới mật độ<106

Phươngpháp pha loãngnồng độ:đếm số lượng khuẩnlạctrênthạch đĩa lạctrênthạch đĩa

104

-Mỗi mộtTB VSV sống sẽpháttriểnthành 1 đơn vị khuẩn lạc(colony forming unit – CFU)

-Mẫu đượcpha loãng

trướcnuôicấytrên môitrường thạch đĩa rắnđếm số lượng khuẩn lạctrênđĩa

tínhđược số lượngvsv có trong 1g/1ml mẫu -Phươngpháp nàychỉ xácđịnh số lượngTB cònsống -Độchính xác cao

Thao tác cấy gạt và đổ đĩa

9/12/2017 TS. Nguyễn Thị Tuyết Lê 105

Phương pháp xác định số có xác xuất lớn nhất MPN (Most probale number)

- Là kỹ thuật nhằm ước lượng số vk lớn nhất có trong mẫu 

95% số lượng vk nằm trong khoảng xác định

- Sử dụng đối với những vk không phát triển trên môi trường rắn

- Thường được sử dụng để kiểm tra các vk coliform trong mẫu nước (Kiểm tra lên men đường

lactose a. lactic)

- Pha loãng mẫu dãy 5 ống/9 ống đếm số ống dương tính

- Kết quả được so sánh với bảng

MPN: Đơn vị MPN/ml 106

- Sử dụngquangphổ

(spectrophotometer) để đo% sự hấp phụánh sang củaMT nhanh

- Khimật độTB trong dung dịch

nuôicấy>106/ml mức độ đụcmà

mắt thườngcóthểpháthiện được.

Mức độ đụcmáy cóthểpháthiện được từ107– 108/ml

- Phươngpháp này không chính xác

nếumôitrườngnuôicấy bị tạp với chỉ số lượng rất nhỏvk khác

- Đặc biệt ở pha suy vong trong quá trình sinhtrưởng, số lượngTB chết

caoKết quảchomật độTB cao

nhấtkhông phânbiệt đượcTB

sốngvà TB chết 107

Phương pháp so màu: kiểm tra mật độ vsv trong môi trường nuôi cấy

Phươngpháp mànglọc (membrane filtration)

- Sử dụngkhisố lượngvk trongmẫu

quánhỏ đểpháthiện vớicác

phươngpháp khác: Kiểmtra coliform trongmẫu nước uống

VK chỉ thị

- Lấy tối thiểu100ml mẫu nước lọcqua mànglọcvi khuẩncó

đườngkínhlỗ lọc nhỏvi khuẩn

không qua được, nằm lạitrên mànglọc

- Mànglọcsau khilọc được đặtvào

đĩaPetri có dung dịchnuôicấy

VK mọctrên mànglọcđếm số lượng khuẩn lạc

108

Màngđượcnuôi trên MT lactose glucuronide agar Khuẩn lạcmàu vàng và màu xanhnước biển: coliform;Khuẩn lạcmàu xanh lá cây: E.coli

Vi sinh vật đại cương 9/12/2017

Cácphươngpháp xácđịnhgiántiếp: Xácđịnhsinhkhối Xácđịnhsinhkhối

- VSV nuôicấytrên MT dịch thể/lỏnglọc/ly tâmloại bỏdung dịchcân toànbộ phần cặn(xác TB)