ngănkhông cho virus cúm sao chéptrưởngthành và phóng thích ra
khỏi tếbàobằngcáchức chếmen neuraminidase (chính là kháng nguyên Ncủa lớp vỏvirus cúm).
23
• Thuốc ức chế protease: Indinavir, Ritonavir, Saquinavir, Nelfinavir(điều trịHIV).Cơ chếtácđộng: làm cho men phân giải đạm củaHIV khônghoạt động đượckhông nhân lên!
• Gamma globulin và Interferon: Gamma globulinngănvirus xâmnhập vào TB vì có chứa kháng thể chống lại kháng nguyênbề mặt nằm trênlớp vỏ của virus. Còn Interferon kháng virusbằngcáchngăn cảnvirustổng hợpprotein, RNA hoặcDNAcủanó trong TB.
Sựkhángthuốc: Thayđổihìnhdạng đểkhángthuốc - virus (cúm A) không cócơ chế chỉnh sửacác sai sót trong quá trình sao chépdẫn đến sự biến đổi cấutrúc genở những virusmớixuất hiệncác phân type virus mới với những kháng nguyênmới
- Virus cúm còn cóthểtrao đổi, trộn lẫn chất liệugenđể chuyển từloài này sang loài khác vàsảnsinh ra virus lai - chính làmộtphân type virusmới. Dođócóthểvào lúc này, virus là"đíchtácdụng" của một số thuốckháng virus,nhưng vào lúc khác, nólạithayđổivà không còn là"đíchtácdụng"
2.3.5. Nuôicấyvirus
a. Nuôicấytrênđộng vật cảm thụ
• Ứng dụngtrong: Phânlậpvirus; Nghiêncứu đặctính sinhhọc củavirus; Cơ chếgâybệnhtrêncơ thể/cáctổ chứcriêngbiệt; Chế tạovacxin (dại, viêm não).
• Loại động vật:Chọn động vật cảm thụthíchứng với từng loại virusnhưdùng gà giò cho virutnewcastle,chuột nhắt trắng cho virus viêm não, sóc cho virus cúm,lợnchoai cho virusdịch tả lợn...
• Vịtrí gâynhiễm:chọn dựavào tínhchấtgâybệnh của từng loạivirus vàmục đíchnghiêncứu như nhỏ mũi/tiêm vào khí quản(virusđườnghôhấp); tiêm vào não (virushướng thần kinh:dại, viêm não);vạchtrên da (virushướng thượngbìnhư virusđậu); tiêm vào xoangbụng vớivirushướng phủ tạng Nhược điểm: Nuôicấylàphức tạp tốnkém, dễgây lây lan bệnh; Vấn đề“súcquyền”
25
b. Nuôicấytrên phôiđangpháttriển
• Được sử dụng rộngrãi dođa sốvirus cóthểpháttriển đượctrên phôiđộng vật, trongđóphôi gàđược sử dụng rộngrãi.Phương pháp nuôicấynàyđơn giản thuận lợi, kinhtế, chokết quảnhanh và cóthểthuđược một lượngviruslớntrongthờigianngắn
• Nuôicấytrên phôi gà: Tùythuộcvàoloạivirus màchọn tuổiphôi thíchhợpvàlựa chọn đườngtiêm vào cáctổ chứckhác nhaucủa
phôi
• Sau khi tiêm dùng parafin vô trùnggắn lỗ
tiêm tiếp tục ấp ở
36oC/ 2-3 ngàytheo dõisự biến đổi đại thể của tổ chức phôi để đánhgiásựpháttriển củavirus.
26
Nuôi cấy virus trên phôi gà
Đánh giá biến đổi đại thể của tổ chức phôi Nuôi cấy virus cúm A trên phôi gà 10 ngày tuổi và thu dịch túi niệu 1.Soi trưng đánh dấu,
đục lỗ
2. Tiêm trứng, gắn
Paraffin nuôi cấy
3. Thu hoạch phôi đánh giá
27
c. Nuôicấytrên môitrườngtếbàotổ chức
• Nuôicấy tếbào môcủa ngườivàđộng vậttrên các môitrườngdinh
dưỡng tựnhiêngồm huyếtthanhđộng vật, nướcép nhau thai, chất đệm.. hay môitrường tổng hợp gồmaxit amin, hydratcacbon, lipit,
muốikhoáng có thêmhuyếtthanh
• Cấyvirus vàotếbàoVirus sinhtrưởng tăng số lượngvà làm thoái hóa TB: gâynhững biến đổi đặc trưng ở tếbào - CPE (Cytopathic Effect) (Suchman et al., 2007):
Dung giải tếbào (lysis cells)
Tếbàonhiễmvirus trươngto và dínhlại vớinhaunhưchum nho (swelling and clumping)
Thoái hóađiểm(foamy degeneration): dạng bọtkhí do hình thành không bào trong nguyên sinhchất
Hình thànhthể hợpbào (syncytia) với những tếbàođanhânlớn
Xuất hiệncácthểvùi (inclusion bodies) 28
29
2.3.6. Hiện tượng cản nhiễm và Interferon
a. Hiện tượng cản nhiễm (interference)
• Kháiniệm:Sựxâmnhiễm của một số loạivirus vàotếbào
trước đã ngăn cản sựnhân lêncủavirus xâmnhiễmvàotế
bàotiếptheođó.
• Cóthểphânbiệtcáchiện tượng cản nhiễmkhác nhau: