Thực hiện việc tách chiết chitosan, chitin từ sinh khối nấm sợi theo 3 phương pháp ở sơ đồ 1.4 , 1.5 và 1.6
Sấy 65oC đến khối lượng không đổi
Ly tâm thu chitosan (5000v/p, 15phút)
Sinh khối ướt
Giữ ở 90oC trong 120 phút NaOH 2% Ly tâm 5000 v/p trong 15 phút Rửa cặn bằng nước cất axetic 2% Thu cặn Chỉnh pH =9 Thu dịch Giữ ở 60oC trong 6 giờ
Ly tâm 5000 v/p trong 15 phút
Thu tinh thể chitosan
Rửa bằng axeton Sấy khô ở 20oC
Sơ đồ 1.4 : Quy trình tách chiết chitosan, chitin (Phương pháp 1 [22])
Sấy 65oC đến khối lượng không đổi Sinh khối ướt
Hấp ở 121oC trong 15 phút NaOH 1M Ly tâm 5000 v/p trong 15 phút Rửa cặn bằng nước cất axetic 2% Giữ cặn Chỉnh pH =10 Thu dịch Giữ ở 95oC trong 8 giờ
Ly tâm 5000 v/p trong 15 phút
Ly tâm thu (5000v/p, 15phút)
Thu tinh thể chitosan
Rửa bằng ethanol
Sấy khô ở 60oC
Sơ đồ 1.5 : Quy trình tách chiết chitosan, chitin (Phương pháp 2 [24])
Sinh khối ướt
Sấy 65oC đến khối lượng không đổi
Giữ 100oC trong 90 phút NaOH 1M Ly tâm 5000 v/p trong 15 phút Rửa cặn bằng nước cất HCl 1M Giữ cặn Chỉnh pH =8,5 Thu dịch
Giữ ở 90oC trong 5 giờ
Ly tâm 5000 v/p trong 15 phút
Ly tâm (5000v/p, 15phút)
Thu tinh thể chitosan
Rửa bằng axeton
Sấy khô ở 60oC
Sơ đồ 1.6 : Quy trình tách chiết chitosan, chitin (Phương pháp 3 [25])
Quy trình tách chiết chitosan,chitin gồm các bước cơ bản sau :
- Thủy phân sinh khối trong xút loãng 2-4 % để loại bỏ protein, lipid và các hợp chất tan trong kiềm.
- Sử dụng acid loãng như acid acetic, acid chlohydric nồng độ 2-4% để phá thánh tế bào, loại bỏ glucan, khoáng.. dùng nhiệt để đẩy nhanh q trình tách và hịa tan chitosan vào trong dung dịch acid loãng.
- Ly tâm, giữ lại cặn là chitin, thu dịch trong.
- Kết tủa tinh thể chitosan bằng cách nâng pH dung dịch lên pH kiềm (pH từ 8,5 đến 10 tùy theo phương pháp)
- Ly tâm, loại bỏ dịch sấy thu tinh thể chitosan dạng khan