4. Nội dung nghiên cứu
3.2.2. Đường cong tích lũy enzyme ngoại bào
Để xây dựng đường cong tích lũy enzyme ngoại bào của chủng nấm T.polyzona
HUIBF21, tiến hành nuôi cấy lỏng trong môi trường sinh tổng hợp laccase BSM bổ sung 10% D-glucose ở 30°C, lắc 180 vòng/phút. Kết quả theo dõi sau 15 ngày nuôi được thể hiện ở hình 3.9
Hình 3.9. Đường cong tích lũy enzyme của chủng T.polyzona HUIBF21 trong 15 ngày. Kết quả nghiên cứu cho thấy sau 3 ngày đầu nuôi cấy, hoạt độ laccase xác định được là 213 U/ml ± 0.46 do ở thời điểm này chủng đang phải trải qua quá trình thích nghi với môi trường, quá trình trao đổi chất diễn ra chậm.
Từ ngày 6 đến ngày 9, chủng nuôi đã dần thích nghi với môi trường, mặc dù lượng sinh khối tăng không nhiều (kết quả thể hiện ở đường cong sinh trưởng) quá trình tổng hợp enzyme tăng hơn 3 ngày đầu và hoạt độ thu được lần lượt đạt 246,6389 U/ml ± 0.41 và 296,5278 U/ml ± 0.52. Điều này cũng có thể cho thấy laccase từ chủng nấm nghiên cứu là enzyme được tổng hợp ở pha sớm của quá trình sinh trưởng.
Ở những ngày theo dõi tiếp theo, hoạt độ laccase tiếp tục tăng nhanh cùng với quá trình phát triển sinh khối tế bào và đạt ngưỡng cao nhất ở 12 (đầu pha cân bằng) ngày nuôi do gặp điều kiện nuôi cấy thích hợp sinh khối tế bào tăng nhanh, các hoạt động trao đổi chất diễn ra thuận lợi nên lượng enzyme tổng hợp được nhiều, hoạt độ enzyme xác định được ở thời điểm này là 434,0278 U/ml ± 0.23.
trưởng của chủng nấm có mối quan hệ mật thiết với khả năng tích lũy enzyme ngoại bào của chủng T.polyzona HUIBF21. Kết quả này được dùng cho các thí nghiệm tiếp theo.