2. Ph−ơng pháp nghiên cứu
2.3.2.Kỹ thuật miễn dịch sắc ký
Tiến hành làm tại Phòng xét nghiệm Vi sinh, Viện Da liễu Quốc gia, sử dụng que thử Hexagon của hãng Human - Đức.
Dung môi xử lý bệnh phẩm gồm: hệ đệm phosphat pH: 8,2. Mercaptoethanol: 10 mmol/ml, chất tẩy, chất bảo quản.
- Nguyên lý của kỹ thuật Hexagon:
Kháng thể kháng LPS đơn dòng có gắn chất màu và kháng thể kháng LPS đa dòng (dê) đ−ợc gắn vào vạch thử nghiệm ở thanh thử để xác định kháng nguyên LPS của các dòng Chlamydia trachomatis. Kháng thể kháng IgG chuột đa dòng gắn ở vạch kiểm tra.
Khi nhỏ mẫu bệnh phẩm đã đ−ợc xử lý bằng dung dịch chiết tách LPS vào ô tròn của thanh thử, hỗn dịch chảy qua tấm thấm, LPS đ−ợc bắt giữ bởi kháng thể đơn dòng kháng LPS và chất kết hợp màu tạo thành một phức hợp miễn dịch. Phức hợp miễn dịch này kết hợp với kháng thể kháng LPS ở vạch thử nghiệm và hình thành một vạch màu tím đỏ nếu
nh− có sự hiện diện của kháng nguyên Chlamydia Trachomatis trong mẫu thử.
Chất kết hợp màu thừa sẽ tạo phản ứng ở vạch kiểm tra với kháng thể kháng IgG chuột tạo thành một vạch màu tím đỏ thứ hai, điều này chứng tỏ thuốc thử hoạt động tốt.
- Kỹ thuật :
+ Lấy bệnh phẩm: bệnh phẩm là dịch có các tế bào biểu mô niệu đạo, cổ tử cung, lấy đ−ợc càng nhiều tế bào biểu mô càng tốt.
ở nam: dùng tăm bông đ−a vào niệu đạo khoảng 1,5 cm, xoay nhẹ vài vòng để tế bào biểu mô niệu đạo có thể bám vào tăm bông.
ở nữ: tr−ớc khi lấy, dùng bông lau sạch cổ tử cung cho hết dịch nhày. Dùng tăm bông đ−a vào trong cổ tử cung khoảng 1,5 cm, xoay nhẹ vài vòng để lấy tế bào biểu mô cổ tử cung.
+ Nhúng tăm bông vào dung dịch xử lý bệnh phẩm, để 15 phút, ngoáy đều.
+ Nhỏ từ từ dung môi đã hoà bệnh phẩm vào băng giấy sắc ký trong que test.
+ Đọc kết quả sau 20 phút. - Cách đọc kết quả: C T C T C T C T
âm tính D−ơng tính D−ơng tính Làm lại nhẹ xét nghiệm