CHƯƠNG 2 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.7.NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA NANO BẠC
Để thử khả năng kháng khuẩn của dung dịch chứa nano bạc tạo được. Chúng tôi tiến hành thử nghiệm kháng khuẩn trên vật liệu gốm xốp có tẩm nano bạc với vi khuẩn Bacillus Subtillis .
2.7.1. Giới thiệu về vật liệu gốm xốp
a. Vật liệu gốm xốp
Hệ thống gốm lọc nước thông thường bao gồm một màng gốm xốp,bình chứa bằng nhựa hoặc gốm, và một vòi nhựa. Nước được đổ vào phần trên hoặc đổ trực tiếp vào màng lọc, nơi mà lực hấp dẫn kéo nó thông qua các lỗ
trong gốm lọc và đi và phần dưới của bình chứa. Nước sau khi được lọc sẽ được chứa ở một bình bên dưới và được lấy ra sử dụng.
Hình 2.9. Gốm xốp được dùng làm thiết bị lọc nước
b. Nguyên lý lọc nước của gốm xốp
Nguyên lý của lõi lọc là: người ta tạo ra các lõi lọc có khe lọc rộng từ 100 nanomet, có thể ngăn được vi khuẩn không đi xuyên qua lõi lọc. Khi vi khuẩn đi vào lõi lọc, nó bị mắc kẹt tại các khe lọc. Với vật liệu lọc nước được trộn với Nano bạc (Ag+), khi nằm tại các khe lọc, bạc Nano silver có đủ thời gian để giết chết vi khuẩn, và hạn chế vi khuẩn phát triển trong lõi lọc, tránh được nguy cơ vi khuẩn phát triển và phá vỡ tấm lọc.
Ý nghĩa của từ "nano" đối với lõi lọc này không phải là kích thước lọc đạt cỡ nano, mà là ứng dụng nano bạc (Ag+) trong việc diệt vi khuẩn.
Các phân tử nano bạc thường được kết hợp trong các lõi than hoạt tính, hoặc các lõi lọc có kết hợp với các vật liệu hấp phụ khác. Xét về khả năng diệt vi khuẩn thật sự của kim loại bạc thì bạc không có khả năng diệt khuẩn tức thời khi nước đi qua. Bạc chỉ có khả năng tiêu diệt vi khuẩn nếu thời gian tiếp xúc của vi khuẩn với nano bạc là lớn hơn 6 phút. Nano bạc thực sự hữu ích trong các ứng dụng phủ lên các bề mặt, để diệt khuẩn trên các bề mặt vật dụng.
2.7.2. Môi trường nuôi cấy vi khuẩn Bacillus Subtillis
a. Thành phần môi trường LB
Bảng 2.1. Thành phần môi trường LB
STT Hóa chất Hàm lượng
1 Pepton 10 gam
2 Cao nấm men 5 gam
3 NaCl 5 gam
4 Thạch agar 20 Gam
b. Cách pha chế môi trường
Hòa các thành phần trên vào nước cất, định mức đến 1 lít. Đem nấu trong nồi hấp ở 121oC trong vòng 20 phút. Sau khi hấp, để nguội, đổ khoảng 30ml môi trường vào mỗi đĩa peptri và cho môi trường đông lại trong buồng tiệt trùng.
c. Nuôi cấy vi khuẩn
Cách tiến hành:
Dùng 3 cục gốm xốp mới, cho từng cục gốm vào 3 ca đựng, đục lỗ để cố định. Đổ ngập gốm lần lượt các dung dịch nano bạc, bạc nitrat và dịch chiết lá húng quế. Sau khi 3 dung dịch được lọc qua hoàn toàn ta đem cục gốm xốp đó sấy khô ở nhiệt độ khoảng 800C cho đến khô rồi cho cả 3 cục gốm cố định lại vào ca đựng như ban đầu.
Đổ dung dịch chứa vi khuẩn Bacillus Subtillis vào 3 ca cho ngập gốm đợi cho quá trình lọc diễn ra, thu lấy dung dịch pha loãng 7 lần.
Sau đó tiến hành cấy vi khuẩn bằng cách cho vài giọt dung dịch đã pha loãng ở trên lên môi trường thạch trên 3 đĩa peptri. Dùng que chữ L chan đều trên bề mặt để phân tán dung dịch đều trên bề mặt thạch. Trong quá trình cấy vi khuẩn phải được thực hiện trong tủ vô trùng, thường xuyên rửa tay và dụng cụ bằng cồn tuyệt đối để tránh đĩa thạch bị nhiễm vi khuẩn từ bên ngoài.
Sau khi cấy vi khuẩn lên đĩa thạch và thực hiện theo qui trình đã nêu, đợi trong 2 ngày rồi quan sát.
2.8. SƠ ĐỒ QUY TRÌNH THỰC NGHIỆM TẠO NANO BẠC
Toàn bộ quy trình thực nghiệm nghiên cứu tạo nano bạc bằng dung dịch bạc nitrat từ dịch chiết nước lá húng quế được thể hiện ở hình 2.10
Hình 2.10. Quy trình thực nghiệm Khảo sát nồng độ dung dịch AgNO3 Khảo sát tỉ lệ thể tích dịch chiết Khảo sát nhiệt độ tạo nano Khảo sát pH môi
trường tạo nano Lá húng
quế tươi Xử lý Mẫu nguyên liệu (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Chiết Nghiên cứu hạt nano Bạc Độ ẩm lượng Hàm tro
Khảo sát thời gian chiết Khảo sát tỉ lệ R/L Dịch chiết tối ưu + dd AgNO3 Tạo hạt nano Bạc Đo XRD TEM Đo Đo EXD Xác định chỉ số hóa lý Định tính các nhóm chức Thử khả năng kháng khuẩn