6. Bố cục của luận văn
3.2.2. Tinh chế berberin clorid
Sau khi thu thập tài liệu và tiến hành các thí nghiệm sơ bộ, tôi tiến hành tính chế berberin clorid theo sơ đồ được trình bày ở Hình 3.2.
Hình 3.2. Sơ đồ quy trình tinh chế berberin clorid bằng Ethanol 96%
Dịch lọc
thực hiện 2 lần Nguyên liệu berberin clorid (50%), 2 gam
- Ethanol (96%), 700C -Than hoạt tính 5% khối lượng so với nguyên liệu
- Dd HCl 0,1N (1%) so với thể tích ethanol 96%
- Siêu âm tầng số 50 Hz, thời gian 15 phút - Khuấy, đun hồi lưu cách thủy
Tủa berberin clorid
-Kết tinh, lọc -Sấy áp suất giảm
Bỏ bã
- Hạ nhiệt độ
- Để lắng, lọc chân không
Bỏ dịch lọc
Kết quả tinh chế berberin clorid dạng bột màu vàng đặc trưng, thể chất đồng nhất. Hình ảnh berberin clorid nguyên liệu ban đầu được trình bày ở Hình 3.3 và berberin sau tinh chế được trình bày ở Hình 3.4.
Hình 3.3. Berberin nguyên liệu Hình 3.4. Berberin tinh chế
Kết quả xác định hàm lượng berberin clorid sau khi tinh chế được trình bày ở Bảng 3.6.
Bảng 3.6. Hàm lượng berberin hydroclorid (C20H18NO4Cl) sau khi tinh chế
Dung môi Khối lượng berberin thô (gam) Khối lượng berberin kết tinh (gam) Độ ẩm (%) Hàm lượng berberin clorid tính theo chế phẩm khan (%) Hiệu suất tinh chế (%) Ethanol 96 % 2,00 0,915 10,0 99,83 85,10
Nhận xét: Theo kết quả khi tinh chế thì hàm lượng berberin clorid ứng với dung môi ethanol 96 % đạt 99,83 %. Kết quả định lượng đạt tiêu chuẩn Dược điển Việt
Nam IV (chứa 95,0% đến 102,0% C20H18NO4Cl, tính theo chế phẩm đã làm khô).
Thực tế cho thấy, quá trình tinh chế có rất nhiều yếu tố ảnh hưởng tới quy trình, các yếu tố như dụng cụ thí nghiệm, thiết bị, kích thước hạt than hoạt tính, thời gian đun hồi lưu, thời gian để kết tinh, thất thoát do dụng cụ, sấy, cân…làm giảm hàm lượng và hiệu suất tinh chế.
Giai đoạn tinh chế berberin clorid sử dụng phương pháp kết tinh lại trong dung môi ethanol 96%. Phương pháp này có nhiều ưu điểm: dễ thực hiện, thiết bị dụng cụ
đơn giản, thời gian tinh chế ngắn, hiệu suất cao, thu hồi được dung môi để tái sử dụng. Nhược điểm: sản phẩm có tính bám màu, khó thiết kế thành mô hình khép kín. Dựa trên nguyên lý khi tăng nhiệt độ thì độ tan tăng. Vì vậy để berberin clorid kết tinh trong dung môi tinh chế cần phải giảm dần độ tan của berberin. Giải pháp lựa chọn là tạo ra dung dịch quá bão hòa sau đó giảm nhiệt độ. Dùng than hoạt tính có kích thước phù hợp để tẩy màu. Chú ý kích thước bột than quá mịn sẽ ảnh hưởng đến độ tinh khiết của sản phẩm tinh chế. Dung môi thực hiện là nước và ethanol rẻ tiền, hòa tan được hoạt chất berberin, ít độc hại.
Với quá trình tinh chế khá đơn giản nhưng cần chú ý đến các công đoạn và yếu tố ảnh hưởng khi nâng cao cỡ mẽ tinh chế như: thiết bị, nhiệt độ, khuấy trộn, rút dịch chiết, gạn, lọc, hút chân không, kết tinh, sấy…
Trong thí nghiệm định lượng berberin bằng phương pháp phân tích quang phổ và sắc ký lỏng cao áp theo Dược diển Việt Nam.
Để nâng cao hiệu suất tinh chế berberin clorid ta có thể tái sử dụng dung dịch lọc sau khi đã lấy phần kết tinh berberin. Tuy nhiên điều này cần nghiên cứu kỹ bởi khả năng có tạp chất và hiệu quả kinh tế mang lại.
Mục đích của quá trình tinh chế là tạo nguyên liệu berberin có hàm lượng cao, tinh khiết cao cho việc nghiên cứu hỗn dịch nano. Vì vậy quy trình tinh chế và kết quả hàm lượng berberin clorid tinh chế đạt yêu cầu cho các nghiên cứu tiếp theo.