2. Nội dung chi tiết của đề cương luận văn thạc sĩ
2.2.5. Phương pháp thu sinh khối VKTQH
Phương pháp ly tâm
Ở phương pháp này sẽ sử dụng máy ly tâm với 6 tốc độ quay khác nhau: 3000 vòng/phút, 4000 vòng/phút, 5000 vòng/phút, 6000 vòng/phút, 7000 vòng/phút và 8000 vòng/phút trong 5 phút. 35ml mẫu được chuyển vào ống ly tâm 50ml. Khả năng tích lũy sinh khối (OD800) được kiểm tra trước và sau khi ly tâm để đo hiệu quả thu hoạch. Sau đó sinh khối VKTQH được hoà tan để thu được dung dịch đậm đặc. Dung dịch đậm đặc được nuôi cấy trong các bình thử nghiệm chứa môi trường DSMZ 27 lỏng cho đến khi OD800
khoảng 0,1- 0,2. Các bình thử nghiệm được nuôi cấy trong điều kiện yếm khí với ánh sáng đèn sợi đốt ở 5000 lux. Sự phát triển của dung dịch đậm đặc sinh khối ở các tốc độ khác nhau được theo dõi trong 5 ngày.
Phương pháp lắng tủa hóa học
Phương pháp này sẽ được thử nghiệm trên ba chất đông tụ hóa học, nhôm polyclorua, nhôm sunfat và sunfat sắt với những liều lượng khác nhau. Hỗn hợp VKTH trong nuôi cấy thử nghiệm (với ∆OD800 khoảng 2,0 - 2,5) được cho vào các bình 100 ml. Nồng độ nhôm sunphat, sắt sunphat được kiểm soát theo cấp độ từ 500 đến 4000 mg.L-1. Nồng độ nhôm polychloride được kiểm soát theo cấp độ từ 1000 đến 8000 mg.L-1 .Các bình sau đó được đặt trên máy lắc với tốc độ 100 vòng / phút trong 15 phút. Sau khi đông tụ, các mẫu được để lắng trong 60 phút. Sau khi lắng, 5 mL mẫu được thu thập từ giữa các bình và xác định phần trăm tế bào bị loại bỏ.
Phương pháp lắng tủa sinh học bằng tủa chitosan
Sinh khối VKTQH được nuôi trong môi trường DSMZ -27 cải tiến, nuôi ở điều kiện kỵ khí sáng, Hỗn hợp VKTH trong nuôi cấy thử nghiệm (với
khoảng 2,0 - 2,5) được cho vào các bình 100 ml. Nồng độ chitosan được kiểm soát theo cấp độ từ 50 đến 250 mg.L-1. Các bình sau đó cũng được đặt vào máy lắc với tốc độ 100 vòng/phút trong 15 phút. Sau khi đông tụ, các mẫu được để lắng trong 60 phút. Sau khi lắng, 5 mL mẫu được thu thập từ giữa các bình và xác định phần trăm tế bào bị loại bỏ.
Hiệu suất lắng tủa được tính theo công thức:
Hiệu suất lắng tủa = (ODban đầu – ODsau lắng)/ ODbanđầu x100%
