Đối tượng và phương pháp nghiên cứu
2.2.4.2. Xét nghiệm tìm sự hiện vi rút:
- Xét nghiệm Test nhanh cúm A: thực hiện tại phòng xét nghiệm sinh học phân tử, bệnh viện Nhi trung ương.
- Xét nghiệm tìm sự hiện diện của vi rút cúm A(H1N1) chủng 2009 trong dịch tỵ hầu bằng phương pháp Realtime RT- PCR.
Bệnh phẩm: là dịch tiết đường hô hấp (dịch tỵ hầu) của bệnh nhân nghi nhiễm vi rút cúm được lấy và đưa đến phòng xét nghiệm sinh học phân tử.
Tại đây, sau quá trình chiết tách sẽ nhận được RNA của vi rút. RNA này được đưa vào môi trường cho quá trình phản ứng. Môi trường này bao gồm các Nucleotit tự do, men sao chép ngược (Revert Transciptidase), chất xúc tác, môi trường đệm, mồi đặc hiệu là các Nucleotide) gắn huỳnh quang....
Trong môi trường tối ưu thì RNA của vi rút sẽ nhân lên và tạo ra các ADN với số lượng lớn hơn.
ADN này sẽ gắn với các mồi đặc hiệu gắn huỳnh quang trong môi trường. Phức hợp này phát quang và sẽ được đọc bằng đầu dò đặc hiệu phát hiện và đếm các ADN gắn huỳnh quang.
Các tín hiệu thu được này sẽ đưa vào xử lý trên máy vi tính bằng phần mềm đặc hiệu và đưa ra kết quả.
Hệ thống máy thực hiện qui trình này là hệ thống máy IQ5 Cycler và Chromo 4 của hãng BIORAD, Mỹ.
Qui trình thực hiện: theo hướng dẫn của Trung tâm kiểm soát bệnh tật Hoa kỳ, được hội đồng khoa học bệnh viện Nhi trung ương chấp thuận.
Nhân viên thực hiện kỹ thuật lấy bệnh phẩm: được các chuyên gia của tổ chức Cúm ASEAN tập huấn, hướng dẫn theo qui trình của Tổ chức y tế thế giới.
Thực hiện tại: phòng xét nghiệm sinh học phân tử, bệnh viện Nhi trung ương.
Hỗ trợ và tư vấn kỹ thuật:
Trung tâm nghiên cứu dịch tễ học lâm sàng trường ĐH Oxford, vương quốc Anh.
Trung tâm kiểm soát bệnh tật Hoa kỳ (Center For Diseases Control and Prevention)
Bộ y tế Việt nam công nhận kỹ thuật xét nghiệm đạt chuẩn quốc gia và được phép công bố kết quả.