2. Mục tiêu của đề tài
3.2.3. Phân tích cấu trúc hợp chất 3
Cấu trúc hóa học của chất 3 được xác định dựa và 1H-NMR, 13C-NMR, HSQC, HMBC và MS, kết hợp so sánh với các tài liệu tham khảo.
Hình 3.15. Phổ 1H-NMR của chất 3
Hợp chất 3 thu được dưới dạng bột màu vàng nhạt. Phổ 1H-NMR thấy xuất hiện tín hiệu cộng hưởng của các proton trong nhóm methyl trong nhóm methoxy (-OCH3) (δH 4.11ppm (s, 3H), 9-OCH3; δH 4.08 ppm (s, 3H), 10-OCH3). Hai nhóm methylen ở vị trí C-5 (δH 3.22 (t, J = 6.4 Hz, 2H) và C-6 (δH 4.95 (t, J = 6.4 Hz,
2H). Nhóm methylen tại C-2 có δH 6.18 ppm (s, 2H) liên kết với 2 nguyên tử oxy. Nguyên tử hydrogen có δH 9.91 (s, 1H) của nhóm CH tại vị trí số 8 liên kết với nguyên tử nitơ ở vị trí số 7. Ngoài ra, có 3 tín hiệu dạng singlet và 2 tín hiệu dạng doublet của các nguyên tử hydrogen của nhân thơm. Với các tín hiệu cộng hưởng đặc trưng trên tương ứng với các proton của phân tử berberine.
Bảng 3.3: Giá trị độ chuyển dịch hóa học 1H NMR của chất 3 TT 13C (ppm, 400 MHz) [93] 1H (δ ppm, J Hz) 13C (ppm, 500 MHz) 2 102.00 6.18 (s, 2H) 102.56 3a 149.87 150.30 4 108.34 7.10 (s, 1H) 108.91 4a 130.66 131.16 5 26.44 3.22 (t, J = 6.4 Hz, 2H) 26.81 6 55.29 4.95 (t, J = 6.4 Hz, 2H) 55.66 8 145.34 9.91 (s, 1H) 145.93 8a 120.40 121.88 9 150.33 150.87 10 143.97 144.15 11 123.42 8.01 (d, J = 9.1 Hz, 1H) 123.99 12 127.3 8.22 (d, J = 9.1 Hz, 1H) 127.25 12a 133.24 133.47 13 120.21 8.96 (s, 1H) 120.68 13a 137.55 137.97 13b 121.46 120.92 14 105.46 7.81 (s, 1H) 105.91 14a 147.72 148.16 9-OCH3 61.92 4.11 (s, 3H) 62.41 10-O-CH3 57.26 4.08 (s, 3H) 57.55
tử carbon. Trong đó có các tín hiệu cộng hưởng của nhóm methyl liên kết với các nguyên tử oxy (nhóm methoxy) tại δC là 57.55 và 62.41 ppm. Nhóm methylen ở vị trí C2 có δC 102.56 ppm liên kết với nguyên tử oxy. Hai nhóm methylen tại C5 và C6 có giá trị độ chuyển dịch hóa học lần lượt là 26.44 ppm (C-5) và 55.29 ppm (C-6). Ngoài ra còn có các nguyên tử carbon trong các vòng thơm. Trên phổ DEPT 135 của chất 3 cho thấy 3 nguyên tử carbon dạng methylen (-CH2-). So sánh với độ chuyển dịch hóa học của 13C của berberine nhận thấy các tín hiệu cộng hưởng của chất 3 tương đối tương đồng.
Hình 3.17. Phổ DEPT - 135 của chất 3
Trên phổ tương quan hai chiều HSQC và HMBC ta nhận thấy các tín hiệu tương tác trực tiếp và gián tiếp của các nguyên tử carbon và hydrogen.
Phổ HMBC chỉ ra một số sự tương quan quan trọng giữa tín hiệu của proton của methyl trong 2 nhóm methoxy tương tác với nguyên tử cacbn tại C-9 và C-10, do đó hai nhóm methyl liên kết với C9 và C10 qua nguyên tử oxy. Kết hợp với phổ NOESY, HSQC và HMBC các tín hiệu cộng hưởng của chất 3 được quy kết chi tiết như trong bảng 3.3.
Hình 3.19. Phổ HMBC của chất 3
Hình 3.21: Phổ khối lượng của 3
Kết hợp với phổ khối lượng có peak ion m/z 336.2 [M]+ (100%), kết hợp với phổ NMR nhận thấy chất 3 và so sánh với dữ liệu về phổ NMR, kết hợp tham khảo tài liệu tham khảo [93], có thể khẳng định chất 3 là berberine, có công thức cấu tạo:
Hình 3.22. Cấu trúc hóa học của chất 3