- Lên men và thu hồi nisin: Sử dụng hệ thống bình lên men 5, 10 l, 100 l và các thiết bị
3.3.2.Kiểm tra khả năng ức chế một số loại vi khuẩn gây bệnh thực phẩm của màng PLA nisin
3.3.1. Mơ tả chi tiết quy trình
Bước 1: Đồng nhất PLA: PLA được cho vào trong dung dịch methylene chloride theo tỉ lệ 3:100 (w/v). Sau đó khuấy từ liên tục 20 phút để đồng nhất PLA.
Bước 2: Tạo hỗn hợp PLA - nisin: Nisin được bổ sung vào dung dịch PLA theo tỉ lệ PLA : Nisin bằng 3:1 (w/w). Khuấy liên tục trong vòng 10 phút để nisin phân bố đều trong dung dịch.
Bước 3: Tráng phủ PLA - nisin lên đĩa thủy tinh Bước 4: Màng để khô tự nhiên trong hệ thống tủ hút
3.3.2. Kiểm tra khả năng ức chế một số loại vi khuẩn gây bệnh thực phẩm của màng PLA - nisin màng PLA - nisin
Khả năng ức chế một số loại vi khuẩn gây bệnh ở thực phẩm của màng PLA - nisin được trình bày trong bảng 3.6.
Bảng 3.6. Khả năng ức chế một số loại vi khuẩn gây bệnh ở thực phẩm của màng
PLA - nisin.
Vi khuẩn Đƣờng kính vịng vơ khuẩn (mm)
L. plantarum JCM1149 9
B. cereus 8
37
Số hóa bởi trung tâm Học liệu– ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn
S. aureus 6
E. coli 0
E. coli O157:H7 0
Kết quả bảng 3.6 cho thấy màng PLA - nisin có khả năng ức chế mạnh vi khuẩn kiểm định L. plantarum JCM1149 (vịng vơ khuẩn 9 mm), và đặc biệt ức chế các loài vi khuẩn Gram (+) như B. Cereus (vịng vơ khuẩn 8 mm), L. Monocytogenes (vịng vơ khuẩn 7), S. aureus (vịng vơ khuẩn 7 mm), các loài này rất dễ nhiễm trong thực phẩm. Màng khơng có khả năng kháng lại vi khuẩn Gram (-): E. coli, E. coli O157:H7. Điều này xảy ra là do nisin tương tác đặc hiệu với lipid II tiền tố
peptidoglucan để phá thủng màng tế bào đích, mà ở vi khuẩn Gram (+), peptidoglycan chiếm 90% khối lượng thành tế bào, số lớp peptidoglycan có thể lên tới 25 lớp. Trong khi đó ở vi khuẩn Gram (-) lượng peptidoglycan chỉ chiếm 10% tổng khối lượng thành tế bào, ngoài ra chúng cịn có một lớp màng ngồi quan trọng (outer membrane – OM). Lớp màng ngồi này có cấu tạo lipid kép tương tự màng ngun sinh chất nhưng khơng chỉ có phospholipids hình thành nên cấu trúc mà cịn có polysaccharide và protein. Lipid và polysaccharide liên kết chặt chẽ với nhau tạo thành một cấu trúc lipopolysaccharide đặc biệt bên ngoài thành tế bào. Vi khuẩn Gram (-) có thể chống chịu lại nhiều tác nhân gây hại đối với tế bào là nhờ vào lớp màng ngồi OM có khả năng ngăn chặn các tác nhân đó một cách có hiệu quả.