2.2.1. Phương pháp nghiên cứu phân lô so sánh
Thí nghiệm được bố trí theo phương pháp phân lô so sánh đảm bảo độ đồng đều về các yếu tố tuổi, tính biệt, số lượng, mật độ, mùa vụ…chỉ khác nhau ở các thí nghiệm đó là thức ăn. Nhân tố thí nghiệm là bột lá sắn và tỷ lệ cân đối bột lá sắn trong thức ăn hỗn hợp của chim cút theo sơ đồ bố trí thí nghiệm sau: Bảng 2.1. Sơ đồ bố trí thí nghiệm Lô TN Chỉ tiêu Lô ĐC 2% BLS 4% BLS Giống chim cút Nhật Bản Nhật Bản Nhật bản Số lượng 35 35 35 Số lần lặp lại thí nghiệm 3 3 3 Thức ăn 1- 35 ngày 100% KPCS 98% KPCS + 2% BLS 96% KPCS + 4% BLS
Bảng 2.2.Thành phần nguyên liệu trong khẩu phần ăn của chim cút
Khẩu phần không có bột lá sắn Khẩu phần có bột lá sắn
Ngô (g) Ngô (g)
Khô đậu tương (g) Khô đậu tương (g)
Bột cá (g) Bột cá (g)
Dầu đậu nành (g) Dầu đậu nành (g)
Methionin(g) Methionin(g)
Muối ăn (g) Muối ăn (g)
ĐCP (g) ĐCP (g)
Premix (g) Premix (g)
Bột lá sắn (g)
2.2.2. Phương pháp theo dõi các chỉ tiêu
2.2.2.1. Khả năng sinh trưởng - Tỉ lệ nuôi sống
Hằng ngày theo dõi chặt chẽ số chim cút chết. ghi chép đầy đủ. cụ thể. qua đó tính được tỉ lệ nuôi sống từng tuần. và cả đợt theo công thức:
Số cuối tuần (con) Tỷ lệ nuôi sống qua các
tuần tuổi (%) = Số đầu tuần (con) × 100 Số cuối kì (con)
Tỷ lệ nuôi sống
trong kì (%) = Số đầu kì (con) × 100
- Khối lượng của chim cút qua các độ tuổi (g)
Cách 7 ngày cân một lần. cân tất cả số chim cút thí nghiệm để xác định khối lượng sống trung bình của đàn qua các độ tuổi. Sử dụng cân có độ chính xác đến 0.1g
Tổng khối lượng chim được cân (g) Khối lượng trung bình =
Số chim được cân (g) × 100 - Sinh trưởng tuyệt đối (g/con/ngày):
Sinh trưởng tuyệt đối: Được xác định bằng sự tăng lên về khối lượng. kích thước trong một đơn vị thời gian.
W1 - W0
A(g/con/ngày) = t1 - t0
- Sinh trưởng tương đối (%)
Sinh trưởng tương đối: Là tỷ lệ % tăng lên về khối lượng, kích thước của con vật qua một khoảng thời gian nào đó.
W1 - W0
R (%) = x 100 W1 + W0
2 Trong đó:
A - Sinh trưởng tuyệt đối R - Sinh trưởng tương đối
W1- Khối lượng, kích thước ở thời điểm cuối khảo sát W0 - Khối lượng, kích thước ở thời điểm bắt đầu khảo sát
t1 - Thời gian kết thúc khảo sát t0 - Thời gian bắt đầu khảo sát 2.2.2.2. Khả năng thu nhận thức ăn
Tổng số thức ăn thu nhận của chim (g) Khả năng thu nhận thức ăn (g) =
Tổng số ngày nuôi x Số chim bình quân - Tiêu tốn thức ăn/ kg tăng trọng khối lượng:
Khối lượng TĂ tiêu tốn trong tuần (kg) Tiêu tốn TĂ/ kg tăng KL
(kg) trong tuần = Khối lượng chim cút tăng (kg)
Khối lượng TĂ tiêu tốn trong kì (kg) Tiêu tốn TĂ/kg tăng KL(kg)
cộng dồn = Tổng khối lượng chim cuối kì (kg) Tổng khối lượng chim non 1 ngày
tuổi(kg) [4] 2.2.2.3. Theo dõi một số chỉ tiêu sinh lý. sinh hoá máu
- Xác định số lượng hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu bằng máy Celltac F. - Xác định protein tổng số trong huyết thanh và các tiểu phần protein như albumin, globulin, tỷ lệ A/G bằng máy xét nghiệm sinh hóa máu.
2.2.3. Phương pháp làm tiêu bản nhuộm H.E
Chúng tôi tiến hành làm tiêu bản nhu mô gan ở chim cút gồm các bước như sau:
Bước 1: Lấy mẫu gan chim cút ở lô ĐC, lô TN 2% BLS và lô TN 4% BLS (3 mẫu/lô).
Bước 2: Cố định mẫu trong dung dịch Boin pha sẵn 48 giờ. Bước 3: Rửa mẫu dưới vòi nước chảy tự động 48 giờ.
Bước 4: Ngâm mẫu trong cồn 800 chuyển qua 3 lọ, lọ 1: 800; lọ 2: 800; lọ 3: 800, chuyển ngâm trong cồn 900 chuyển qua 3 lọ: lọ 1: 900; lọ 2: 900; lọ 3: 900, chuyển ngâm cồn 1000 chuyển qua 3 lọ: lọ 1: 1000; lọ 2: 1000; lọ 3: 1000. Thời gian mỗi lần ngâm chuyển lọ là 2 giờ.
Bước 5: Ngâm mẫu trong xylon lần lượt chuyển qua 2 lọ, thời gian mỗi lần chuyển lọ là 2 giờ.
Bước 6: Ngâm mẫu trong nến để trong tủ ấm ở nhiệt độ 560C chuyển qua 2 lọ, thời gian chuyển lọ trong 2 giờ.
Bước 7: Đúc tổ chức gan trong nến.
Bước 8: Cắt tiêu bản bằng máy cắt chuyên dụng. Bước 9: Nhuộm tiêu bản
- Tẩy nến bằng suylon trong tủ ấm ở nhiệt độ 600C thời gian là 4 giờ. - Tẩy suylon bằng cồn 1000.
- Tẩy cồn bằng nước thường.
- Nhuộm mẫu bằng hematoxylin trong 5 phút sau đó rửa nước.
- Nhuộm mẫu bằng eozin trong 10 phút sau đó rửa sạch bằng nước, rửa qua cồn 900, cồn 1000, rửa qua xylem, sau đó dán lamen bằng bomcanada.
2.2.4. Phương pháp xử lý số liệu
Xử lý số liệu theo phương pháp thống kê sinh vật học (sử dụng phần mềm Minitab) với các chỉ số X , mX , CV(%) [18].