và laccase của 2 chủng nấm Earliella sp. FPT31 và Ganoderma sp FMD12
3.6. Thành phần và cấu trúc EPS của FMD12 và FPT31
Các phổ NMR nhận được đối với EPS của chủng FMD12 cho thấy EPS từ này có cấu trúc khá đơn giản. Trên phổ 1H và 13C-NMR của mẫu FMD12 thu được (Hình 9a và b), tại vùng anomeric của phổ 1H (từ 4,9- 5,2 ppm) và 13C (từ 96,5–98,7 ppm) đều xuất
galactose;các píc tại 96,6 và 4,97ppm là của -D-glucose. Các tín hiệu từ 3.6-4.2 ppm trên phổ 1H và 58 – 80 ppm trên phổ 13C là thuộc về proton và carbon vòng pyranoid. Dựa vào giá trị tích phân các pic của proton anomeric trên phổ 1H, có thể tính được tỷ lệ của các đường như sau glucose: galactose ≈ 3:1.
a b
Hình 3.9. Phổ HSQC của EPS sinh từ chủng FMD12
Không đơn giản như EPS của chủng FMD12, các phổ NMR nhận được đối với EPS của chủng FPT31 cho thấy thành phần đường của EPS này tương đối phức tạp (Hình 3.10a và b ). Vùng anomeric trên phổ 1H (4,9- 5,3 ppm) và 13C (92,4- 103,6 ppm) xuất hiện rất nhiều pic. Điều này chứng tỏ EPS của chủng FPT31 được cấu thành từ nhiều loại đường trong đó có thể dự đoán chiếm tỉ lệ lớn hơn cả là β-glucose (13C/1H
92,5 và 4,99 ppm), α-galactose ( H 96,4 và 5,06 ppm) và α-glucose tại (
103,5ppm và 5,2 ppm). Vùng pic từ 58 – 80 ppm trên phổ 1H và 3,2- 4,6 ppm trên phổ 13C là của các proton và carbon trong vòng pyranose. Tuy nhiên, để làm sáng rõ hơn về các loại đường khác có mặt trong EPS của FPT31 thì EPS này cần được tinh chế thêm hoặc kết hợp với các phương pháp phân tích khác.
a b
Hình 3. 10 Phổ HSQC của EPS sinh từ chủng FPT31
Nhiều polysaccharide từ các nấm khác cũng đã được công bố về thành phần các đường và cấu trúc của chúng. Các phân tích bằng NMR cho thấy các phân đoạn polysaccharide chiết từ quả thể của Flamulina velutipes có thành phần và tỉ lệ các đường đơn khác nhau. Phân đoạn chiết trong KOH 2% PK2 chứa chủ yếu là glucan với thành phần chính là glucose; phân đoạn chiết trong KOH 21% PK25 chứa 3 thành phần chính
(Xylomannan- XM) gồm 2 loại đường chủ yếu với tỷ lệ mannose: xylose là 3:2. Hai phân đoạn còn lại là SM1 và SM2 có tỉ lệ % mannose: xylose lần lượt là 9:91 và 3:97 [119]. Cũng dựa trên các kết quả phân tích bằng NMR, các β-glucan không tan từ
Ganoderma lucidum có thành phần chính là α- glucose (44,8%) và 23,8%), ngoài ra còn
có fructose (4,3%) và mannose (4,26%) trong khi chất đối chứng Laminarin (β- glucan polysaccharide) có thành phần là 42,7% α- glucose và 47% β- glucose [45]. Một nghiên cứu khác của Sharma và đtg (2015) đã công bố thành phần đường của polysaccharide của chủng nấm Cordyceps gracilis Durieu & Mont thu từ dịch lên men và được phân tích bằng HPLC. Kết quả cho thấy thành phần các đường đơn của polysaccharide gồm glucose (62,15%), xylose (21,14%), rhamnose (36,81%), mannose (14,76%) [114].