Động vật thí nghiệm

CHƢƠNG 2 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP

2.3 Động vật thí nghiệm

Động vật thí nghiệm là chuột nhắt trắng, giống đực, thuần chủng, dòng Swiss, trưởng thành, khỏe mạnh, trọng lượng 22  2 g (n = 92) được chia ngẫu nhiên thành chia thành 7 nhóm (Bảng 2.5).

Bảng 2.5. Các nhóm chuột xử lí hóa chất.

Nhóm n Cách xử lý

ĐC 11 Uống dung dịch 0,9% NaCl

ĐC (+) 11 Uống dung dịch silymarin phytosome TN1 16 Gây độc bằng cho uống CCl4

TN2 16 Gây độc bằng cho uống CCl4 + mangostin phytosome liều 0,1 mg/10 g TT

TN3 11 Gây độc bằng cho uống CCl4 + mangostin phytosome liều 0,2 mg/10 g TT

TN4 16 Uống mangostin phytosome liều 0,1 mg/10 g TT TN5 11 Uống mangostin phytosome liều 0,2 mg/10 g TT

n: Số cá thể thí nghiệm

Nhóm ĐC: Nhóm chuột đối chứng uống 0,9% NaCl trong 14 ngày với liều lượng 0,1 ml/10 g thể trọng/ngày.

Nhóm ĐC (+): Nhóm chuột đối chứng uống silymarin phytosome

Nhóm TN1: Nhóm gây độc được uống CCl4 trong 14 ngày : hai ngày đầu uống hỗn hợp CCl4 : dầu ăn với tỷ lệ 1:7; mười ba ngày sau với tỷ lệ 1:5. Liều lượng 0,1 ml hỗn hợp/10 g thể trọng/ngày.

Nhóm TN2: Nhóm chuột gây độc bằng cho uống CCl4 có bổ sung uống thêm với mangostin phytosome liều lượng 0,1 mg/10 g thể trọng/ngày trong 14 ngày.

Nhóm TN3: Nhóm chuột gây độc bằng cho uống CCl4 có bổ sung uống thêm với mangostin phytosome liều lượng 0,2 mg/10 g thể trọng/ngày trong 14 ngày.

Nhóm TN4: Nhóm chuột chỉ uống mangostin phytosome liều lượng 0,1 mg/10 g thể trọng/ngày trong 14 ngày..

Nhóm TN5: Nhóm chuột chỉ uống mangostin phytosome liều lượng 0,2 mg/10 g thể trọng/ngày trong 14 ngày.

Trong quá trình thí nghiệm nhóm đối chứng và nhóm nghiên cứu đều được nuôi dưỡng cùng một điều kiện như nhau, hàng ngày được theo dõi, ghi chép diễn biến, cân trọng lượng. Động vật thí nghiệm được uống hoạt chất vào một thời gian nhất định buổi sáng.

Phương pháp cho chuột uống thuốc: dùng kim cong đầu tày chuyên dụng đưa thuốc vào thẳng dạ dày.

Phương pháp lấy mẫu gan: Cho chuột nhịn ăn 24 giờ trước khi lấy mẫu thử. Giết chuột bằng cách cắt đầu nhanh. Mổ nhanh lấy gan và cân trọng lượng. Cân 0,3 g gan rửa trong đệm lạnh (100 mM Tris-HCl; 250 mM sucrose, pH 7,4) để loại bỏ máu và catalase. Sau đó được nghiền đồng thể trong cối chày sứ có cát thủy tinh và 300 l đệm lạnh, với tỷ lệ 1:10. Dịch nghiền được ly tâm 12000 vòng/phút trong 20 phút ở 4C. Bỏ tủa, dịch trong được dùng làm các thí nghiệm xác định hoạt độ enzyme peroxidase và định lượng protein cũng như hàm lượng MDA và nhóm -SH.