α-mangostin chuẩn; LC: mẫu lên cột; 1-10: Các phân đoạn tinh sạch α-mangostin
sau khi lên cột silicagel lần 2)
Kết quả hình 3.2 cho thấy các phân đoạn từ 1-10 xuất hiện duy nhất một băng ngang chuẩn với α-mangostin (Chromadex) có Rf = 0,7 cm trong hệ dung môi dichlomethane : methanol với tỷ lệ 96:4 và không xuất hiện băng phụ, điều này chứng tỏ sau khi qua cột silica gel lần hai, chúng tôi đã thu được α-mangostin sạch. Kết quả này cao hơn so với nghiên cứu của Misra và cộng sự (2009) khi sử dụng hệ dung môi chloroform : methanol với 9:1 có Rf = 0,46 cm [36]. Sự chênh lệch giữa hai giá trị Rf trên có thể là do sự khác nhau của các hệ dung môi được chọn làm pha động khi TLC. Bảng 3.1 cho thấy lượng -mangostin thu được sau khi tinh sạch chiếm 0,142% khối lượng nguyên liệu ban đầu. Kết quả này thấp hơn so với nghiên cứu của Pothitirat và cộng sự (2008), công bố tách chiết được lượng mangostin bao
gồm các hoạt chất -mangostin, -mangostin, -mangostin chiếm 9,94% khối lượng nguyên liệu [50]. Tuy nhiên, lượng -mangostin thu được ở nghiên cứu này cao hơn kết quả nghiên cứu của các tác giả Iinuma và cộng sự tách chiết được lượng - mangostin chiếm 0,0019% khối lượng nguyên liệu thô [25]. Nguyên nhân có thể do hiệu suất thu hồi trong quá trình sắc kí cột silica gel không ổn định, và nguyên liệu có nguồn gốc khác nhau thì hàm lượng -mangostin cũng khác nhau.
Bảng 3.1. Tỷ lệ sản phẩm tách chiết so với nguyên liệu thô.
Sản phẩm So với nguyên liệu thô (%)
Cao chiết ethanol 18,875 ± 0,5210
Cao chiết n- hexan 0, 174 ± 0,0457 - mangostin tinh sạch 0,142 ± 0,0419
Hoạt chất - mangostin tinh sạch được xác định cấu trúc bằng phương pháp cộng hưởng từ hạt nhân. Từ các phổ 1H-NMR, 13C-NMR kết hợp với phổ DEPT, HSQC, HMBC (không dẫn hình); so sánh dữ liệu phổ của hoạt chất - mangostin với các tài liệu trên thế giới và các đặc trưng vật lí, hợp chất trên được xác định đúng là -mangostin như các tài liệu đã công bố. Công thức cấu tạo của - mangostin như sau:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 8a 9a 4a 10a 12 13 14 15 16 17 18 19 20 1' O HO H3CO O OH OH 11 A B