Phần 4 Kết quả và thảo luận
4.1. Kết quả về đặc tính sinh học của chủng virus KTY-PRRS-08 qua các đờ
4.1.2. Kết quả xác định hiệu giá virus qua các đời cấy chuyển
Đặc tính sinh học của chủng virus KTY-PRRS-08 được nghiên cứu qua việc xác định hiệu giá virus. Khay 96 giếng đã phủ tế bào MARC-145 một lớp được chuẩn bị. Số lượng tế bào trong một giếng của khay được xác định bằng cách đếm 4 giếng đại diện ở 4 góc của khay 96 và tính trung bình. Huyễn dịch virus được pha loãng theo cơ số 10 rồi đem ủ trên bề mặt tế bào một lớp của các giếng theo thứ tự đánh dấu trước (25µl/giếng), mỗi độ pha loãng lặp lại 3 lần. Sau một giờ ủ, bổ sung vào mỗi giếng 100µl dung dịch duy trì DMEM có chứa 10% TBP. Để khay tế bào đã gây nhiễm virus trong tủ ấm 37°C/5% CO2.
Quan sát CPE qua các thời điểm 24, 36, 48, 60 giờ,….sau gây nhiễm. Sau đó, virus được thu hoạch và xác định TCID50 theo phương pháp của Behrens-Karber.
Sau khi cấy chuyển trên 90 đời trên môi trường tế bào, tiến hành quan sát xác định hiệu giá virus lần lượt ở các đời P#1, P#10, P#20, P#30, P#40, P#45, P#50, P#60, P#70, P#80, P#90 của chủng virus KTY-PRRS-08 kết quả được trình bày ở bảng 4.3.
Bảng 4.3. Kết quả xác định hiệu giá virus qua các đời cấy chuyển Đời tiếp truyền Chủng virus Hiệu giá virus (TCID50/ML) Đời tiếp truyền Chủng virus Hiệu giá virus (TCID50/ML)
P#1 KTY-PRRS-08 7,11 ± 0,0 x 107 P#10 7,61 ± 0,87 x 107 P#20 7,11 ± 0,0 x 107 P#30 7,11 ± 0,0 x 107 P#40 7,61 ± 0,87 x 107 P#50 8,12 ± 0,87 x 107 P#60 7,61 ± 0,87 x 107 P#70 7,11 ± 0,0 x 107 P#80 7,61 ± 0,87 x 107 P#90 7,61 ± 0,87 x 107
Qua kết quả bảng 4.3 cho thấy chủng virus KTY-PRRS-08 có hiệu giá virus trung bình thấp nhất có giá trị 7,11 ± 0,0 x 107 và hiệu giá virus cao nhất được xác định là đời 50 với giá trị là 8,12 ± 0,87 x 107. Sự chênh lệch về hiệu giá chủng virus KTY-PRRS-08 qua các đời cấy chuyển là không đáng kể. Như vậy, chủng virus KTY-PRRS-08 có hiệu giá tương đối cao, ổn định qua các đời cấy chuyển thể hiện qua sự chệnh lệch giá trị giữa các đời không đáng kể.
Theo Nguyễn Thu Trang (2015), hiệu giá virus nhược độc Hanvet1.Vn qua các đời cấy chuyển từ P#1 – P#10 dao động từ 106,37TCID50/ml - 106,63TCID50/ml. Theo chúng tôi có sự sai khác này có thể là do chủng virus nhược độc Hanvet1.Vn có độc lực thấp hơn so với chủng virus KTY–PRRS– 08. Tuy nhiên, khi so sánh với kết quả nghiên cứu của Lê Thị Toan và cs. (2016) nghiên cứu về đặc tính sinh học của chủng virus KTY-PRRS-05 phân lập tại Việt Nam qua các đời cấy chuyển thì kết quả trong nghiên cứu này là hoàn toàn phù hợp.