Trẻ nhịn ăn và khụng uống bất kỳ một loại nước giải khỏt nào để làm xột nghiệm hemoglobin và chiết tỏch huyết thanh xột nghiệm IGF 1, kẽm. Sau khi lấy mỏu xột nghiệm trẻ em được tổ chức để cỏc bà mẹ cho ăn sỏng tại chỗ. Mỗi trẻ em lấy 2 ml mỏu cho vào ống nghiệm, chiết tỏch huyết thanh rồi chia vào 2 ống Eppendoff để đo hàm lượng IGF-1, kẽm. Cỏc mẫu huyết thanh đều được bảo quản trong tủ lạnh õm sõu ở nhiệt độ -800C cho đến khi phõn tớch. Cỏc dụng cụ phõn tớch mỏu, đặc biệt dựng cho đo kẽm đều được trỏng rửa bằng acid chlohydric HCl 1%, sấy khụ trước khi dựng để loại trừ nhiễm kẽm từ mụi trường.
+ Định lượng nồng độ kẽm huyết thanh tại labo khoa Vi chất, Viện Dinh dưỡng quốc giạ
47
Kẽm huyết thanh được định lượng theo phương phỏp quang phổ hấp phụ nguyờn tử (AAS), bước súng 213,9 nm, khe sỏng 0,7 với tốc độ hỳt 3 ml/phỳt, kẽm chuẩn Zn(NO3)2 (Wako Puro Chemical Industry Ltd. Japan), được pha theo cỏc nồng độ 0,2 mg/L, 0,4 mg/L, 0,6 mg/L và 0,8 mg/L. Đỏnh giỏ tỡnh trạng thiếu kẽm: trẻ được coi là thiếu kẽm khi nồng độ kẽm huyết thanh < 10,7 àmol/L, hoặc < 70 àg/dL [78].
+ Định lượng IGF-1 huyết thanh tại labo Khoa Vi chất, Viện Dinh dưỡng quốc giạ Mẫu huyết thanh được tỏch và giữ ở nhiệt độ -800C cho đến khi phõn tớch. IGF-1 được đo bằng phương phỏp ELYSA (KIT IGF-1 6000, DRG, USA).
+ Định lượng Hemoglobin (Hb) theo phương phỏp đo trực tiếp trờn mỏy HemoCue Hb301 Distributor USA, sử dụng 1 giọt mỏu tĩnh mạch, phõn loại thiếu mỏu theo tiờu chuẩn của WHO ở trẻ từ 6 thỏng đến 5 tuổi thiếu mỏu khi Hb dưới 11g/dL [145]. Nguyờn lý: Hemoglobin và dẫn xuất của nú bị ụxy húa thành methemoglobin với sự cú mặt của kali kiềm ferricyanidẹ Methemoglobin phản ứng với kali cyanide hỡnh thành nờn cyanmethemoglobin mà độ hấp phụ cao nhất của nú đạt được ở 540 nm. Cường độ màu đo được tại bước súng 540 nm tỷ lệ với nồng độ Hb.