Qua 6 đợt thu mẫu, tôi đã thu được 39 mẫu nấm Ganoderma. Sau quá trình phân loại sơ ộ và tách cấy hệ sợi, chọn ra được 6 mẫu để phân loại và nghiên cứu (TL44, TL48, TL53, TL.TĐ 18.01, TL.TĐH, TL.TĐ 02).
Với các mẫu nghiên cứu, tôi tiến hành mô tả hình thái ên ngoài và hình thái hiển vi của 6 mẫu thuần này, để từ đó phân loại loài phục vụ cho công tác nghiên cứu chính xác hơn.
a.Ganoderma aff. brownii
(Nguồn gốc ảnh của tác giả)
Hình 3.1: Mẫu nấm TL 44
(Thước đo = 50 mm) Đặc điểm hình thái ên ngoài của các mẫu như sau:
Mẫu TL 44: có kích thước 320mm x 450mm, ề mặt trên của phiến nấm có màu nâu nhạt dần từ cuống ra ngoài mép nấm, viền có màu nâu đen, có các
trắng đục và chuyển dần sang màu nâu xám khi chạm vào. Nấm có mùi hắc nhẹ (Hình 3.1 và 3.2). Mẫu được lấy tại VQG Xuân Sơn, vị trí tọa độ 21o8’17” B – 104o56’34” Đ, độ cao 270m so với mực nước iển.
So sánh với đặc điểm của Ganoderma brownii (Murrill) Gil ertson: Quả thể một năm hay nhiều năm, không cuống, lie gỗ, mũ hình quạt hay già án cầu, kích thước 8-10(52)x11-13x2-3 cm, ề mặt trên màu nâu đen nhẵn, có những rãnh đồng tâm, mép nguyên, đường ất thụ dày 1-1,5 mm. Mô mềm, màu nâu nhạt phân vùng đồng tâm. Lỗ gần tr n màu vàng 4-5 l/mm, ống phân tầng, màu nâu sẫm. Bào tử hình trứng màu nâu nhạt, 2 lớp màng, lớp trong có gai, hình hơi tr n hay elip rộng có kích thước 7,5-9x11-13,5 µm [31].
(Nguồn gốc ảnh của tác giả)
Hình 3.2: Hệ sợi mẫu nấm TL 44 quan sát dƣới kính hiển vi quang học với độ phóng đại 40x
Qua đặc điểm hình thái ên ngoài, tôi nhận thấy mẫu TL 44 có nhiều nét tương đồng nhất với nấm Ganoderma brownii, do đó khẳng định đây là nấm
b.Ganoderma aff. philippi
(Nguồn gốc ảnh của tác giả)
Hình 3.3: Mẫu nấm TL 53
(Thước đo 40mm)
Mẫu TL 53: có kích thước 105mm x 160mm, ề mặt trên của phiến nấm có màu nâu sẫm dần từ cuống ra ngoài mép nấm, viền màu trắng, có các v ng tr n đồng tâm. Cuống nấm dạng dính ên, có màu nâu. Lỗ nấm có màu trắng ngà. Nấm có mùi hắc nhẹ (Hình 3.5 và 3.6). Mẫu được lấy tại VQG Xuân Sơn, vị trí tọa độ 21o8’15” B – 104o56’24” Đ, độ cao 269m.
So sánh với đặc điểm nấm Ganoderma philippi: Quả thể một năm hay nhiều năm, kích thước khoảng 100 x 150 x 60mm không cuống ề mặt trên màu nâu đen, có những v ng đồng tâm lồi lõm, lỗ gần tr n có màu cà phê sữa
vào. Tìm thấy ở Malaysia, Singapore, Indonesia, India [25].
Nhận thấy mẫu TL 53 có nhiều nét tương đồng với đặc điểm mô tả nấm
Ganoderma philippi, do đó đây là nấm Ganoderma aff. philippi.
(Nguồn gốc ảnh của tác giả)
Hình 3.4: Hệ sợi mẫu nấm TL 53 quan sát dƣới kính hiển vi quang học với độ phóng đại 40x
c. Ganoderma sinense
(Nguồn gốc ảnh của Lê Thanh Huyền)
(Thước đo 10mm)
Mẫu TĐ.H: có kích thước 43mm x 33mm, ề mặt trên của phiến nấm có màu nâu đen, viền đồng màu, mặt óng có vân. Cuống nấm dạng dính tâm, có màu nâu đen. Lỗ nấm có màu nâu vàng sáng, viền nâu đen. Nấm có mùi hắc nhẹ (Hình 3.7). Mẫu được lấy tại VQG Tam Đảo.
Sau khi giải trình tự ADN đoạn miền ITS 4-5, khẳng định đây là nấm
Ganoderma sinense với chuỗi:
CGGGTAGTCCTACCTGATTTGAGGTCAGAGGTCATAAGCTTTGTCT CCATACAGAGACCGTTAGAAGCTTGCCAAAACGCTTCACGGTCGC GGCGTAGACATTATCACACCGACAAACCGATCCGCAAGGAATCAA GCTAATGCGTTTAAGAGGAGCCGACCTATAAAGACCGACAAGCCT CCAAGTCCAAGCCTAAAAAGCCTTTACAAAGACCTTGTAGGTTGA AGATTTCATGACACTCAAACAGGCATGCTCCTCGGAATACCAAGG AGCGCAAGGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACTGAATTCTGCA ATTCACATTACTTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCGAG AGCCAAGAGATCCGTTGCTGAAAGTTGTATATAGATGCGTTACATC GCAATACACATTCTAAGACTTTATAGTGTTTGTAATAAAACGCAGG CACAGACGCGCTTCACGAGCTCCGCAGAGCCCGCTCCACAGCCCG TAACCCACAGTAAGTGCACAGGTGTAGAGTGGATGAGCAGGGCGT GCACAGTGCCTCGGAAGGCCAGCTACAACCCAGTCAAAACTCGAT AATGATCCTTCCGCAGGTTCACCTACGGAAACCTTGTTACGAC
d.Ganoderma aff. neo – japnicum Imaz
(Nguồn gốc ảnh của tác giả)
Hình 3.6: Mẫu nấm TL.TĐ 02
(Thước đo 10mm)
Mẫu TL.TĐ 02: có kích thước 60mm x 42mm, ề mặt trên của phiến nấm có màu nâu cánh gián, viền có màu nâu nhạt, có các đường chạy từ cuống. Cuống nấm dạng dính ên, có màu nâu sẫm. Lỗ nấm có màu vàng nâu, gần viên màu trắng ngà và viền ngoài có màu nâu nhạt. Nấm có mùi hắc nhẹ (Hình 3.8). Mẫu được lấy tại VQG Tam Đảo.
So sánh với đặc điểm nấm Ganoderma neo – japnicum Imaz: Quả thể ra hàng năm, cuống đính ên hoặc thỉnh thoảng đính tâm. Mũ nấm có dạng từ hình thận đến phân đôi, phẳng dẹt, phía mép mũ mỏng và quay xuống dưới. Kích thước khoảng 30 x 110 đến 40 x 110mm. Bề mặt nấm hầu như có màu đen, nhẵn, láng óng, có có đường lằn xuyên tâm. Ống nấm có màu nâu vàng
tối. Cuống nấm thẳng đứng, dài khoảng 9cm, ề mặt đen và láng óng [35]. Từ các đặc điểm trên, nhận thấy mẫu TL.TĐ 02 hoàn toàn giống với mô tả nấm Ganoderma neo – japnicum Imaz. Do đó đây chí là nấm Ganoderma
aff. neo – japnicum Imaz.
e. Ganoderma aff. lucidum
(Nguồn gốc ảnh của Lê Thanh Huyền)
Hình 3.7: Mẫu nấm TL.TĐ 18.01
Mẫu TL.TĐ 18.01: có kích thước 65mm x 70mm, bề mặt trên của phiến nấm có màu nâu sẫm dần từ cuống ra ngoài mép nấm, viền có màu nâu vàng, có các đốm vàng, mặt óng, vân không đều. Cuống nấm dạng dính bên, có màu vàng. Lỗ nấm có màu nâu vàng, nhiều vùng loang màu trắng. Nấm có mùi hắc nhẹ (Hình 3.9 và 3.10). Mẫu được lấy tại VQG Tam Đảo.
So sánh với đặc điểm của nấm Ganoderma lucidum: Quả thể một năm, mũ hình án cầu, dạng thận, hay tròn. Mặt mũ có vân đồng tâm, óng như đánh verni, bề mặt màu vàng gỉ sắt, nâu đỏ. Lỗ gần tròn 4-6 lỗ/mm. Cuống
Có thể nhận thấy ngay mẫu TL.TĐ 18.01 giống với mô tả nấm
Ganoderma lucidum, do đó có thể nói đây là nấm Ganoderma aff. lucidum.
(Nguồn gốc ảnh của tác giả)
Hình 3.8: Hệ sợi mẫu nấm TL.TĐ 18.01 quan sát dƣới kính hiển vi quang học với độ phóng đại 40x
f. Ganoderma sp.1
(Nguồn gốc ảnh của tác giả)
Hình 3.9: Mẫu nấm TL 48
Mẫu TL 48: có kích thước 62mm x 47mm, ề mặt trên của phiến nấm có màu nâu vàng, nhạt dần từ cuống ra ngoài mép nấm, viền có màu vàng nhạt không tr n đều, có các v ng tr n đồng tâm. Cuống nấm dạng dính ên, có màu nâu. Lỗ nấm có màu nâu vàng. Nấm có mùi thơm nhẹ (Hình 3.3 và 3.4). Mẫu được lấy tại VQG Xuân Sơn, vị trí tọa độ 21o8’02” B – 104o56’25” Đ, độ cao 270m. Mẫu TL 48 đặt tên là Ganoderma sp.1.
(Nguồn gốc ảnh của tác giả)
Hình 3.10: Hệ sợi mẫu nấm TL 48 quan sát dƣới kính hiển vi quang học với độ phóng đại 40x
Bước đầu luận văn đã phân loại được các mẫu nghiên cứu để phục vụ cho ước kiểm tra khả năng kháng khuẩn tiếp theo.