400 và 800mg/kg
1.4.3. Các mô hình nghiên cứu kháng viêm thực nghiệm
Căn cứ vào các giai đoạn trong quá trình viêm, có thể chia các mô hình thử nghiệm tác dụng chống viêm của thuốc thành hai nhóm gồm các mô hình gây viêm cấp, bán cấp và các mô hình gây viêm mạn.
Bảng 1.2. Một số mô hình nghiên cứu kháng viêm thực nghiệm
Mô hình Đối
tượng Cách tiến hành-Thông số đánh giá
Gây phù chân chuột bằng carrageenan 1% [36] Chuột nhắt trắng
Carrageenan sẽ kích hoạt quá trình giải phóng hàng loạt những chất trung gian gây viêm. Quá trình này gồm 2 pha: (1) giải phóng histamin và serotonin, (2) giải phóng prostaglandin, protease và lysosome.
Pha (1) xảy ra ngay sau khi tiêm dưới da carrageenan và kết thúc sau 2 giờ. Pha (2) diễn ra ngay sau đó và kết thúc sau 5 giờ.
Cách đánh giá: các lô động vật được cho uống mẫu thử, mẫu chứng (diclofenac) và mẫu trắng (nước cất). Sau đó 1 giờ, tiến hành tiêm dưới da carrageenan 1%. Đo và so sánh độ phù chân chuột giữa các lô tại các thời điểm 1, 3 và 5 giờ sau khi tiêm.
Gây phù tai chuột bằng oxazolon [37] Chuột nhắt trắng
Mô hình gây phù tai chuột bằng oxazolon dựa trên phản ứng quá mẫn muộn của cơ thể gây ra bởi oxazolon. Hậu quả là làm vỡ màng tế bào mast, giải phóng ra các chất trung gian gây phù. Mô hình này cho phép đánh giá khả năng chống viêm tại chỗ của thuốc.
Cách đánh giá: Tính tỉ lệ % tăng khối lượng của tai phải so với tai trái rồi tính giá trị trung bình tỉ lệ % tăng khối lượng tai chuột trong mỗi lô. Sau đó tính tỉ lệ phần trăm ức chế phù của lô thử so với lô chứng.
Gây phù tai chuột bằng Phorbol myristate PMA [38]. Chuột nhắt trắng
PMA thúc đẩy sự hình thành gốc tự do in vivo, kích thích hoạt tính phospholipase A2 và tăng tạo chất trung gian hoá học gây viêm. Tiêm chất thử và dung môi pha mẫu vào mỗi bên tai chuột, sau 1 giờ tiêm tiếp PMA vào cả 2 bên tai. Tiến hành song song lô chuẩn và lô đối chứng dương. Sau 6 giờ, tiến hành cân và tính độ giảm khối lượng mỗi bên tai chuột được điều trị và so sánh với lô chuẩn.
Sau đó, có thể tiếp tục tiến hành thử nghiệm Myeloperoxidase (MPO). MPO là enzym của bạch cầu và đại thực bào. Mức độ MPO cho biết nồng độ xuất hiện bạch cầu. Mẫu tai chuột được đồng nhất hoá trong đệm phosphat pH6 chứa hexadecyl trimethylammonium bromide. Sau đó làm đông đá, rã đông và ly tâm 2500 vòng/30 phút ở 40C. Lấy dịch ly tâm đo OD 460 nm.
Mô hình gây ban đỏ bằng tia tử ngoại [37]
Chuột lang
Tia tử ngoại của phenylbutazon và các thuốc chống viêm non steroid có khả năng làm chậm sự phát triển của bản đỏ. Nồng độ prostaglandin E tăng lên trong suốt 24 giờ sau khi da chuột tiếp xúc với tia cực tím bức xạ 280 – 320 nm. Ban đỏ là dấu hiệu đầu tiên của viêm khi phản ứng viêm chưa đi kèm với sự phù nề và tăng tiết dịch/
Cách đánh giá: Đánh giá mức độ bản đỏ một cách trực quan dựa theo thang điểm như sau (0đ): không bản đỏ, (1đ): ban đỏ ít, (2): đỏ da, (4): ban đỏ rất mạnh
Mô hình đo mức độ thẩm thấu mạch máu [37]
Các chất trung gian hóa học gây viêm như là histamin, prostaglandin và leucotrien được giải phóng sau khi tế bào mast bị kích thích, gây giãn các tiểu động mạch, làm tăng tính thấm thành mạch. Kết quả là dịch và protein huyết tương thoát ra gây phù. Những tác động này bị ức chế bởi những thuốc kháng histamin, thuốc ức chế sự chuyển hóa của acid arachidonic và thuốc ức chế thụ thể của leucotrien.
Cách đánh giá: Đánh giá tác dụng chống tăng tính thấm của thuốc thông qua nồng độ chất nhuộm xanh Evans khi tiêm dưới da.