Điều chế và đánh giá các tính chất của các công thức gel nhũ tương tối ưu được lựa chọn. Tiến hành điều chế 3 lô thành phẩm từ các giá trị tối ưu của biến số độc lập, theo cùng điều kiện và quy trình bào chế ở giai đoạn thiết kế. Xác định các giá trị biến số phụ thuộc.
Thực hiện phép tính hệ số biến thiên CV% để kiểm tra tính lặp lại giữa 3 lô.
- So sánh giữa thực nghiệm và dự đoán của phần mềm:
Sau cùng so sánh các giá trị dự đoán từ bởi phần mềm với giá trị trung bình của 3 lần thực nghiệm.
Thực hiện phép tính sai số tương đối để so sánh sự khác nhau giữa kết quả trung bình 3 lô và giá trị dự đoán.
2.2.4. Xây dựng tiêu chuẩn công thức gel nhũ tương dầu Dừa
Bào chế công thức gel nhũ tương từ công thức tối ưu đã xác định với cỡ lô 1000 g. Chế phẩm được xác định các chỉ tiêu chất lượng như sau:
Cảm quan
Mức yêu cầu: sản phẩm có màu trắng đục như sữa, thể chất mềm mịn, có mùi đặc trưng, không biến màu, không cứng lại hoặc tách lớp ở điều kiện thường, không được chảy lỏng ở nhiệt độ 37 oC, phải bắt dính được trên da khi bôi.
Phương pháp thử : Kiểm tra bằng cảm quan. Độ đồng nhất
Mức yêu cầu: chế phẩm phải đồng nhất, không vón cục, không có cấu tử lạ.
Phương pháp thử : Lấy 4 mẫu kem, mỗi mẫu khoảng 0,02 g đến 0,03 g, trải đều trên 4 phiến kính. Đậy lên mỗi phiến kính bằng một phiến kính thứ 2 và ép mạnh cho tới khi tạo thành vết tròn có đường kính khoảng 2 cm. Quan sát vết thu được bằng mắt thường (cách mắt khoảng 30 cm), ở 3 trong 4 tiêu bản không được nhận thấy các tiểu phân. Nếu có các tiểu phân nhìn thấy ở trong phần lớn số các vết thì phải làm lại với 8 mẫu kem. Trong số các tiêu bản này, các tiểu phân cho phép nhận thấy không được vượt quá 2 tiêu bản.
Diện tích dàn mỏng
Mức yêu cầu: chế phẩm phải có diện tích dàn mỏng nằm trong khoảng 30-45 cm2. Phương pháp thử : Thực hiện tương tự như mục 2.2.2.4.
Kích thước tiểu phân
Mức yêu cầu : chế phẩm phải có kích thước trung bình tiểu phân < 10 (µm) Phương pháp thử : thử tương tự mục 2.2.2.4.
pH
Mức yêu cầu: chế phẩm phải có pH từ 5,5-6,5.
Phương pháp thử : Thực hiện tương tự như mục 2.2.2.4. Độ ổn định chu kỳ nhiệt
Phương pháp thử : Thực hiện tương tự như mục 2.2.2.4.
2.2.5 Bào chế sản phẩm kem dưỡng dựa trên gel nhũ tương từ dầu Dừa
2.3.5.1. Kiểm nghiệm nguyên liệu đầu vào sữa ong chúa, phấn hoa và mật ong
Các nguyên liệu đầu vào được khảo sát và phải đạt các chỉ tiêu chất lượng mới được chọn làm nguyên liệu đầu vào cho bào chế kem dưỡng da.
Mật ong
Bảng 2.10. Chỉ tiêu chất lượng của mật ong
Chỉ tiêu
Phương pháp phân tích mẫu mật ong
Mức yêu cầu Chỉ tiêu chất lượng
Hàm lượng nước Ref AOAC 969 38B < 23%
Hàm lượng đường khử Ref EC 152-2009 > 45 g/ 100 g
Độ acid TCVN 5271:2008 < 50 mili đương lượng/ kg Hàm lượng Chì (Pb) Ref AOAC 986.15 < 0,05 mg/kg
Hàm lượng Cadimi (Cd) Ref AOAC 986.15 < 0,05 mg/kg Hàm lượng Asen (As) Ref AOAC 986.15 < 0,05 mg/kg Hàm lượng thủy ngân (Hg) AOAC 974.14 < 0,02 mg/kg
Chỉ tiêu vi sinh
Coliforms TCVN 6848:2007 < 10 CFU/g
E.coli TCVN 7924-2:2008 < 10 CFU/g
Staphylococus aureus TCVN 4830-1:2005 < 10 CFU/g
Bacillus cereus TCVN 4492:2005 < 10 CFU/g Phấn hoa
Bảng 2.11. Chỉ tiêu chất lượng phấn hoa
Chỉ tiêu chất lượng Phương pháp phân tích
mẫu phấn hoa Yêu cầu
Hàm lượng nước TCVN 5263:1990 < 8%
Hàm lượng tro không tan trong acid TCVN 4071 : 2009 < 4% Hàm lượng protein AOAC 955-04 > 10 g/ 100 g Sữa ong chúa
Bảng 2.12.Chỉ tiêu chất lượng sữa ong chúa
Chỉ tiêu Phương pháp phân tích
mẫu sữa ong chúa Yêu cầu
Hàm lượng nước TCVN 5263:1990 < 65 %
Hàm lượng tro không tan trong acid TCVN 4071 : 2009 < 0,1 % Hàm lượng protein AOAC 955-04 > 10 g/ 100 g Tổng số vi sinh vật hiếu khí TCVN 4884:2005 < 104 CFU/g
Coliforms TCVN 6848:2007 < 10 CFU/g
Escherichia coli TCVN 7924-2:2008 < 3 CFU/g
Staphylococcus aureus TCVN 4830-1:2005 < 10 CFU/g
Bacillus cereus TCVN 4992:2005 < 10 CFU/g
2.2.5.2. Chiết xuất phấn hoa
Phương pháp loại tạp trong phấn hoa
Qui trình loại tạp chất trong phấn hoa
- Rây và thổi bỏ bụi cát sạn có kích thước lớn.
- Loại bỏ chân, lông ong: cho phấn hoa vào cốc chứa nước cất được làm lạnh ở 5 -10 0C vớt bỏ nhanh lớp màng bên trên bề mặt hỗn dịch. Sau đó lọc qua bộ dụng cụ hút chân không.
- Sấy phấn hoa ở 45 - 50 0C đến khi độ ẩm còn dưới 8%.
Chiết xuất phấn hoa
- Ngâm 1 phần phấn hoa vào 4 phần ethanol 70% chai thủy tinh có nút kín. Lắc hỗn hợp ít nhất 1 lần/ ngày trong suốt 8 ngày.
- Sau đó, hỗn hợp được cô quay chân không với máy cô quay chân không Heldolph đến khi còn ¼ thể tích với các thông số 100 atm, 120 vòng/phút, nhiệt độ bể chứa nước 70 0C. Sau đó dịch chiết được lưu trữ trong chai thủy tinh màu tối ở nhiệt độ 2 - 8 oC.
2.2.5.3. Định lượng hàm lượng protein trong dịch chiết phấn hoa.Phương pháp kjeldahl ( Dược điển Việt Nam V phụ lục 10.9) Phương pháp kjeldahl ( Dược điển Việt Nam V phụ lục 10.9)