CHƯƠNG 1 : TỔNG QUAN
1.3. Thiết bị sắc ký lỏng khối phổ hai lần HPLC-MS/MS
1.3.1. Hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC)
S c ký l ng là quá trình tách x y ra trên c t tách vắ ỏ ả ộ ới pha tĩnh là chấ ắt r n và pha động là ch t l ng (s c ký l ng - r n). Mấ ỏ ắ ỏ ắ ẫu phân tích được chuy n lên cể ột tách dướ ại d ng dung d ch. Khi ti n hành ch y s c ký, các chị ế ạ ắ ất phân tích được phân b liên t c gi a pha ố ụ ữ động và pha tĩnh. Trong hỗn h p các ch t phân tích, do c u trúc phân t và tính ch t lí ợ ấ ấ ử ấ hoá c a các ch t khác nhau, nên kh ủ ấ ả năng tương tác của chúng với pha tĩnh và pha động khác nhau. Do v y, chúng di chuy n vậ ể ới tốc độ khác nhau và tách ra khỏi nhau[14].
V ề cơ bản, LC-MS/MS như các thiết b s c ký khác, thi t b HPLC bao g m 3 ị ắ ế ị ồ ph n chầ ính:
- Phần đầu là bình chứa dung môi pha động: có 4 bình ch a 4 lo i dung môi khác ứ ạ
nhau. Tùy thu c vào c u tộ ấ ạo bơm 2 kênh hoặc bơm 4 kênh kết h p v i ch ợ ớ ế độ chạy isocratic hoặc gradien mà có thành phần pha động mong mu n. ố
- Phần tách: là ph n trung gian c a h s c ký bao g m c t tách và c t ph ầ ủ ệ ắ ồ ộ ộ ụ trợ (ti n ề c t), buộ ồng điều nhi t c t, b phệ ộ ộ ận bơm mẫ ự độu t ng. Mẫu phân tích được b phộ ận bơm m u t ng n p vào h ẫ ự độ ạ ệ thống v i dung tích (c µl) tùy thu c kh ớ ỡ ộ ả năng cột tách.
- Phần phát hi n và x lí s u: ệ ử ố liệ Ở đây ệ thốh ng HPLC thông th ng bao g m các ườ ồ detector, ph n khuầ ếch đại tín hi u, ph n chuyệ ầ ển đổi tín hiệu tương tự sang tín hi u s . ệ ố
20
Máy tính s ẽ lưu trữ ữ liệ d u nhận được và ph n m m x lí s u ( tùy thu c t ng hãng ầ ề ử ố liệ ộ ừ theo thi t bế ị) cho các kết quả phân tích.
S c ký l ng hiắ ỏ ệu năng cao bao g m nhiồ ều phương pháp có đặc thù riêng, đó là sắc ký l ng pha liên k t; sỏ ế ắc ký trao đổi ion; s c ký c p ion, sắ ặ ắc ký điện di mao qu n; s c ký ả ắ phân b l ng-l ng; s c ký rây phân tố ỏ ỏ ắ ử...Phương pháp đượ ử ục s d ng r ng rãi nh t là sộ ấ ắc ký l ng pha liên k ỏ ết.