Tốc độ dòng pha động liên quan đến quá trình thi t l p cân b ng c a ch t tan trong ế ậ ằ ủ ấ hai pha tĩnh và pha động. Khi tốc độ pha động nh , ch t phân tích ra mu n, gây doãng ỏ ấ ộ chân pic, giảm độ nh y và tạ ốn dung môi. Ngượ ạc l i, khi tốc độ pha động quá l n có th ớ ể làm cho các ch t trong h n h p mấ ỗ ợ ẫu chưa kịp tách ra kh i nhau, dỏ ẫn đến hiện tượng chồng pic và gây áp su t lớn trong bơm [14 ấ ].
Trong ch ế độ chạy tr n dung môi, khi c nh ch ộ ố đị ế độ đo phần MS/MS b ng cách ằ tăng dầ ỷ ện t l ACN và thay đổ ốc độ pha đội t ng các m c:0,5; 0,6; 0,7 ; 0,8 ; 0,9 và 1 ở ứ ml/phút căn cứ độ ẹp pic, độ h cân x ng cứ ủa pic để ự l a ch n. Th c nghi m cho th y t i t ọ ự ệ ấ ạ ỷ l ệ thể tích c a hai kênh A và kênh B là 65% : 35%, tủ ốc độ dòng là 0,6 ml/phút píc thu được nh n, họ ẹp và cân đối.
Hình 3.1: Sắc ký tổng ủa ácc c HCBVTV
Chúng tôi nh n th y tậ ấ ốc độ dòng th c nghi m (0,6 ự ệ ml/phút) nh ỏ hơn so mức khuyến cáo c a nhà s n su t ủ ả ấ (1 ml/phút). Nhưng điều này là phù hợp vớ ệ thối h ng HPLC-MS/MS vì tốc độ dòng thấp sẽ thu n lậ ợi cho quá trình hóa hơi dung môi, tách và ion hóa hoạt chất phân tích của nguồn ion hóa ESI.
39
Bảng 3. Điều kiện tốc độ dòng pha động để tách hỗn hợp HCBVTV1. Thời gian
(phút)
Tốc độ dòng
(mL/phút) Kênh A Kênh B
0-7 0,6 65 35