Chương II PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu
3.3.Kỹ thuật sản xuất chế phẩm nấm Isaria javanica
• Quy trình sản xuất chế phẩm sinh học từ nấm Isaria javanica để phòng trừ sâu hại cây trồng
Thu thập mẫu nấm
Phân loại, phân lập, nuôi cấy nấm
Nuôi cấy nấm trên môi trường PDA
Cấy chuyển nấm từ môi trường PDA sang môi trường rắn
Sau khi thử nghiệm nhân sinh khối nấm Isaria javanica trên môi trường rắn, chọn được môi trường được phối trộn theo công thức 2 gồm bốn thành phần cám gạo, bột ngô, nước và trấu theo tỉ lệ 3:1:2:1 là thích hợp nhất, tiến hành nhân sinh khối trên môi trường đó. Sau 15 ngày cho lượng bào tử lớn nhất, thu hồi sinh khối ở giai đoạn này , hoạt hóa, gia công, đóng gói và bảo quản.
• Phương pháp bảo quản
Có thể bảo quản chế phẩm theo hai phương pháp sau
+ Bảo quản tươi: để nguyên chế phẩm ở trong bình nhân nuôi, bảo quản trong điều kiện phòng thí nghiệm.
+ Bảo quản khô: Sau khi quá trình nhân sinh khối nấm Isaria javanica trên môi trường rắn hoàn thành, tiến hành sấy khô chế phẩm ở nhiệt độ 38oC trong 8 giờ liên tục, xay nấm thành bột và trộn lẫn với chất mang theo tỉ lệ 3:2, đóng gói và để nơi khô thoáng..
Kết quả đếm nồng độ bào tử của chế phẩm theo 2 cách bảo quản trên được thể hiện ở bảng 3.5 và hình 3.6.
Bảng 3.5. Nồng độ bào tử của chế phẩm nấm Isaria javanica theo 2 cách bảo quản: khô và tươi
Cách bảo quản
Nồng độ bào tử qua các tháng bảo quản(x108 bt/g)
1 tháng 2 tháng 3 tháng
Bảo quản tươi 4,227a 4,155a 4,020b
Bảo quản khô 4,183a 4,163a 4,117a
CV (%) 2,08 1,39 0,27
LSD0,05 0,31 0,20 0,38
Từ kết quả thực nghiệm cho thấy:
Sau 1 tháng bảo quản nồng độ bào tử ở phương pháp bảo quản tươi cao hơn so với phương pháp bảo quản khô, do trong quá trình đưa chế phẩm sấy để bảo quản thì có một phần bào tử bị bay ra ngoài.
Hình 3.5. Nồng độ bào tử của chế phẩm nấm Isaria javanica sau 3 tháng bảo quản bằng hai phương pháp
Sau 2 tháng bảo quản nồng độ bào tử của chế phẩm ở 2 phương pháp bảo quản là tương đương nhau. Đến tháng thứ 3 sau bảo quản, nồng độ bào tử ở chế phẩm tươi giảm mạnh do sợi nấm có xu hướng tàn lụi nhanh. Nồng độ bào tử của chế phẩm ở phương pháp bảo quản khô ổn định hơn so với phương pháp bảo quản tươi.
Như vậy, sau khi thu hồi sinh khối, nên bảo quản chế phẩm theo phương pháp bảo quản khô.