c) Phương pháp 3.
7.2.4.4. Sn x ut vaccine tái th p (Recombinant Vaccines) ợ
Vaccine tái t h p gene hay còn g i là vaccine dổ ợ ọ ướ ơi đ n v , đây là lo i vaccineị ạ
th h m i đế ệ ớ ượ ạc t o ra nh k thu t di truy n. Vaccine tái t h p gene đờ ỹ ậ ề ổ ợ ượ ảc s n xu t d a trên nguyên t c chuy n gene kháng nguyên c a đ i tấ ự ắ ể ủ ố ượng gây b nh vàoệ
m t vi sinh v t nào đó. Vi sinh v t này sinh sôi n y n nhanh chóng và s n xu t raộ ậ ậ ẩ ở ả ấ
các phân t kháng nguyên. Tách chi t , tinh s ch các kháng nguyên làm vaccine dử ế ạ ưới đ n v .ơ ị
Quy trình s n xu t vaccine tái t h p gene nhìn chung ph c t p, nh ng nguyênả ấ ổ ợ ứ ạ ư
t c chung đ u tr i qua các bắ ề ả ước sau đây:
- Tuy n ch n ngu n gene có bi u hi n kháng nguyên chính c a virus (khángể ọ ồ ể ệ ủ
nguyên b m t ho c kháng nguyên lõi), thao tác c t gene.ề ặ ặ ắ
- Ch n vector thích h p (plasmide), c t plasmide và g n gene kháng nguyênọ ợ ắ ắ
vào đ t o vector tái t h p.ể ạ ổ ợ
- Ch n v t ch thích h p đ đ a vector vào. V t ch có nhi u lo i nh viọ ậ ủ ợ ể ư ậ ủ ề ạ ư
khu n, n m men, virus (ch ng h n ẩ ấ ẳ ạ E. coli, S. cerevisae, adenovirus, virus đ u,ậ
baculovirus v.v...).
- Nuôi c y, lên men.ấ
+ N u vi khu n, n m men thì nuôi c y trong môi trế ẩ ấ ấ ường đ nhân lên lể ượng l n kháng nguyên.ớ
+ N u là virus thì ph i nhân lên trong t bào đ ng v t hay th c v t thích h p.ế ả ế ộ ậ ự ậ ợ
- Tách chi t và làm s ch các protein kháng nguyên b ng phế ạ ằ ương pháp hoá sinh thông thường.
- T o vaccine phân t d ng ch ng, d ng tiêm.ạ ử ạ ủ ạ
- Ti n hành th hi u l c trên đ ng v t và trên lâm sàng.ế ử ệ ự ộ ậ
Hi u l c c a vaccine ph thu c vào nhi u y u t . Bên c nh b n ch t khángệ ự ủ ụ ộ ề ế ố ạ ả ấ
nguyên m nh, y u thì con đạ ế ường đ a vaccine vào c th cũng r t quan tr ng: daư ơ ể ấ ọ
hay niêm m c, tiêm hay ch ng, th i gian s d ng vaccine, l n s tiêm ch ng vàạ ủ ờ ử ụ ầ ố ủ
kho ng cách gi a các l n, li u lả ữ ầ ề ượng dùng, tu i dùng và theo dõi đ dài mi n d ch.ổ ộ ễ ị
N u là mi n d ch d ch th th vaccine b ng ph n ng trung hoà kháng nguyênế ễ ị ị ể ử ằ ả ứ
kháng th , ELISA, mi n d ch huỳnh quang, mi n d ch phóng x . N u là mi n dichể ễ ị ễ ị ạ ế ễ
t bào thì phát hi n đo lế ệ ường các t bào T, B và phát hi n các y u t T và B.ế ệ ế ố