c) Phương pháp 3.
7.2.3.Sn x ut các cytokin ấ
Cytokin ngày nay đang tr thành m t hàng kinh doanh l n c nh tranh gi a cácở ặ ớ ạ ữ
công ty Tonen ( Nh t b n), Genetech (M ), Delta (Anh), Rhone Poulene (Pháp). G nậ ả ỹ ầ
c a t bào lymphocyte T. Nhóm Th1 bài ti t interleukin 2 (IL-2) và ủ ế ế γ-interferon (IFN-γ); nhóm Th2 bài ti t IL-4, IL-5, IL-6 và IL-10.ế
Đ s n xu t m t s lể ả ấ ộ ố ượng l n cytokin đáp ng cho nhu c u ch a b nh cácớ ứ ầ ữ ệ
công ty trên th gi i ngày càng đ u t m nh m vào con đế ớ ầ ư ạ ẽ ường công ngh gen vàệ
công ngh sinh h c. Đ s n xu t cytokin tái t h p ngệ ọ ể ả ấ ổ ợ ười ta s d ng các k thu tử ụ ỹ ậ
tái t h p DNA tiêu chu n và nh ng ch t bi n d đ nh hổ ợ ẩ ữ ấ ế ị ị ướng v oligonucleotideề
được ti n hành khi dùng h th ng bi n d ế ệ ố ế ị in vitro c a hãng Amesham. Cácủ
oligonucleotide đượ ổc t ng h p trên máy t ng h p DNA 391.ợ ổ ợ
Dòng t bào ế E. coli IB 392 đã được bi n hình đ bi u hi n vector (v t ch )ế ể ể ệ ậ ủ
ch a đo n DNA (mã hoá IL-2, IL-1ứ ạ α và INF-α) c a c u đủ ừ ược bi n đ i đ s nế ổ ể ả
xu t các protein tái t h p. Vi khu n đấ ổ ợ ẩ ược nuôi c y l n lên qua đêm trong môiấ ớ
trường Mq 30ở oC r i hoà loãng 20 l n b ng môi trồ ầ ằ ường tươi, gi 34ữ oC cho đ n khiế
có DD 600 =1, s trự ương ph ng plasmide đồ ược gây ra b ng t bào 42ằ ủ ế ở oC qua 20 phút. Sau đó ti p 5 gi 37ủ ế ờ ở oC đ t o ra các protein tái t h p. Các t bào để ạ ổ ợ ế ược ly tâm 5000 vòng /phút trong th i gian 30 phút và l ng c n gi nhi t đ 20ờ ắ ặ ữ ở ệ ộ oC cho đ n khi s d ng.ế ử ụ