Xác định LOD và LOQ của phƣơng pháp

CHƢƠNG 2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ KĨ THUẬT THỰC NGHIỆM

2.4.Xác định LOD và LOQ của phƣơng pháp

Giới hạn phát hiện là nồng độ nhỏ nhất của chất phân tích tạo ra được một tín hiệu có thể phân biệt được một cách tin cậy với tín hiệu trắng (hay tín hiệu nền). Hiện nay có nhiều cách xác định giới hạn phát hiện khác nhau. Phổ biến nhất hiện nay vẫn là cách xác định theo qui tắc 3 [42,95].

Ta có: yp = yb + 3b hay yp = yb + 3Sb (2.17)

Trong đó yp là tín hiệu ứng với giới hạn phát hiện và yb là tín hiệu mẫu trắng;

b hoặc Sb là độ lệch chuẩn của nồng độ hoặc tín hiệu mẫu trắng. Có thể xác định yb và Sb như sau: Tiến hành n thí nghiệm để xác định nồng độ mẫu trắng, thu được các giá trị y0i (i = 1-n). Từ đó tính y0 và S0 theo các công thức sau:

2i o i o i b b (y - y ) y y = ; S = (2.18) n n-1  

Biết tín hiệu yp sẽ tính được LOD từ phương trình đường chuẩn y =a + bx dưới dạng LOD = xp = (yp-a)/b.

Ngoài ra, LOD còn được tính toán phương pháp của phòng thí nghiệm Wincosin [160]:

LOD = t(n-1, 1-∞=0,99).SD (2.19)

Trong đó: - t(n-1, 1-∞=0.99) : là giá trị hệ số student với độ tin cậy 99% và độ lệch chuẩn ước lượng với độ tự do n -1.

- SD: độ lệch chuẩn của nồng độ sau n lần thí nghiệm. LOD tính toán được phải thỏa mãn các yêu cầu sau đây:

- LOD < lượng chuẩn thêm vào < 10.LOD

- Tỷ số S/N thỏa mãn điều kiện:2<S/N = X 10 SD - Thực hiện ít nhất 7 mẫu lặp

49 - Hiệu suất thu hồi: 60120%.

Giới hạn định lượng (LOQ) của phương pháp được tính theo theo công thức sau:

LOD LOQ 10 (2.20) 3  2.5 Hóa chất và thiết bị 2.5.1 Hóa chất

Pha dung dịch chuẩn

Dung dịch chuẩn MEAC: Cân chính xác 0,0600 gam thuốc thử MEAC cho vào cốc 50 mL, thêm từ từ dung môi MeOH, khuấy đều. Sau đó, chuyển dung dịch vào bình định mức 100 mL, định mức tới vạch bằng dung môi MeOH, thu được dung dịch thuốc thử có nồng độ 10-3M.

Dung dịch chuẩn DEAC: Cân chính xác 0,0776 gam thuốc thử DEAC rồi cho vào cốc 50 mL, thêm từ từ dung môi MeOH vào cốc, khuấy đều. Sau đó, chuyển dung dịch vào bình định mức 100 mL, định mức tới vạch bằng dung môi MeOH, thu được dung dịch thuốc thử có nồng độ 10-3M.

Dung dịch chuẩn TEAC: Cân chính xác 0,1129 gam thuốc thử TEAC cho cốc 50 mL, thêm từ từ dung dịch MeOH vào cốc, khuấy đều. Cho dung dịch vào bình định mức 100 mL, định mức đến vạch bằng dung môi MeOH, thu được dung dịch thuốc thử có nồng độ 10-3M.

Các dung dịch Th(IV), Pb(II), Cr(III), Eu(III); La(III);Ni(II), Fe(III), Sm(III)... được pha từ muối nitrat tương ứng sau khi đã sấy đến khối lượng không đổi để loại bỏ độ ẩm.

Dung dịch nghiên cứu: Cho một lượng thuốc thử vào bình định mức 25 mL và thêm dung dịch chứa ion kim loại vào bình sao cho nồng độ của thuốc thử và ion kim loại sau khi định mức là 2.10-5M. Thêm dung dịch đệm điều chỉnh pH của hệ, sau đó định mức đến vạch.

50

Dung di ̣ch so sánh: Hỗn hợp dung môi dùng đề hòa tan thuốc thử hoặc dung dịch TEAC cùng nồng độ ở cùng giá trị pH với phức.

Dung dịch đệm: Dùng các dung dịch CH3COOH/CH3COONa và Na2HPO4/ NaOH.

Dung dịch chuẩn so sánh MES-05-HG-1: Gồm các nguyên tố (Ag, Al, As, B, Ba, Bi, Ca, Cd, Co, Cr, Cu, Fe, K, Li, Mg, Mn, Mo, Na, Ni, P, Pb, Zn…) của Merck được cung cấp bởi Trung Tâm Phân tích Công Nghệ Cao- Hoàn Vũ.

Chất chuẩn dạng rắn SL-1 và SOIL-7: được cung cấp bởi Trung tâm phân tích-Viện Nghiên cứu hạt nhân.

Các hóa chất khác: Axit nitric HNO3 nồng độ 65%; metanol (MeOH), axetonitril (MeCN), P.A, Merck. Th(NO3)4.5H2O; UO2(NO3)2.3H2O; La(NO3)3.6H2O; Eu(NO3)3.5H2O; Sm(NO3)3.6H2O, P.A; Fe(NO3)3.9H2O; Pb(NO3)2 ,P.A; Cr(NO3)3; Ni(NO3)2; CH3COOH; NaOH rắn; NaNO3 rắn; P.A Merck. Các hóa chất sử dụng đều đạt độ tinh khiết phân tích.

2.5.2. Thiết bị

(1) Thiết bị UV-VIS hai chùm tia Lambda 25 của hãng Perkin Elmer (Mỹ) (2) Thiết bị cộng hưởng từ 1H-NMR DPX 400 và phổ 1C-NMR Bruker ADVANCE-600

(3) Thiết bị FT-IR 1000 của hãng Perkin Elmer (Mỹ).

(4) Hệ thiết bị IC-ICP-MS Elan 6000 của hãng Perkin Elmer (5) Hệ thiết bị HPLC-MS của hãng Perkin Elmer (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});

(6) Hệ phổ kế gamma đa kênh nối với detector siêu tinh khiết HP-Ge; độ phân giải 1,9 keV tại đỉnh 1173 keV và 1332 keV của 60Co

(7) Máy cất nước 2 lần của hãng Hamilton (Anh); cân phân tích Afcoset, độ nhạy 10-5 gam (Ấn Độ), máy đo pH Thermo Orion- 290 (Mỹ). Các dụng cụ thủy tinh: pipet các loại từ 1 -25 mL, ống đong, bình định mức, bình tam giác, cốc, phễu chiết các loại, phễu lọc, chén platin, micropipet các loại, các bình, lọ polyetylen (PE) đựng mẫu…được mua từ hãng Merck; Cộng hòa Liên bang Đức.

51