3. đỐI TƯỢNG, đỊA đIỂM, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.3.2.2. Phương pháp chế tạo môi trường.
Trong quá trình nghiên cứu chúng tôi ựã sử dụng các loại môi trường nhân tạo PDA, PCA, Czapeck, WẠ
* Môi trường PDA
Thành phần: + Khoai tây: 200 gram
+ Agar: 20 gram
+ đường Glucose: 20 gram
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦ.. 33 Chế tạo (1000 ml): Khoai tây gọt sạch vỏ, thát lát mỏng, ựem ựun sôi với nước cất 30 phút, sau ựó lọc bằng vải mỏng qua phễụ Nước lọc cho thêm nước cất ựủ 1000 ml ựem ựun sôi lạị
Cho vào lần lượt Agar khuấy ựều cho tan hết, sau ựó ựổ môi trường vào bình tam giác, hay ống nghiệm có ựậy nút giấy bạc (Bình tam giác, ống nghiệm, hộp petri ựã ựược rửa sạch và sấy khô ở nhiệt ựộ 1800C trong hai giờ) Sau ựó ựem khử trùng trong nồi hấp áp suất 1,5 atm (1210C) trong 30 phút.
Môi trường ựã khử trùng dùng ựể phân lập hoặc nuôi cấy nấm, có thể bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt ựộ < 00C .
* Môi trường PCA
Thành phần: + Khoai tây : 15 gram + Agar: 20 gram + Cà rốt: 10 gram + Nước cất: 1000 ml điều chế môi trường PCA tương tự như môi trường PDẠ * Môi trường Czapeck
Thành phần:
+ đường Sacarose : 20 gram
+ NaNO3: 1,0 gram Agar: 20 gram
+ MgSO4: 0,5 gram Nước cất: 1000 ml + FeCl3: 0,01 gram + KCl: 0,5 gram
điều chế môi trường: đong ựủ 1000 ml nước cất ựem ựun sôi, rồi cho lần lượt các hoá chất ựã ựược cân ựủ lượng vào, khuấy ựều cho tan hết, sau ựó ựổ môi trường vào bình tam giác hay ống nghiệm có ựậy nút gấy bạc (bình tam giác, ống nghiệm, hộp petri ựã ựược rửa sạch và sấy khô ở nhiệt ựộ 1080C trong hai giờ). Rồi ựem khử trùng trong nồi hấp, cách khử trùng tương tự trong môi trường PDẠ
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦ.. 34 * Môi trường WA
Thành phần:
+ Agar: 20 gram
+ Nước cất: 1000 ml
điều chế môi trường: đun tan Agar trong nước cất sau ựó khử trùng. Cách làm tương tự các môi trường trên.