NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.3.8 Phương pháp kiểm tra tính m ẫn cảm của các chủng E.coli và Salmonella v ới kháng sinh và hoá dược
Bảng tiêu chuẩn phân tích kết quảñường kính vòng vô khuẩn
ðường kính vòng vô khuẩn (mm) Tên kháng sinh
và hoá dược Ký hiệu
Hàm lượng (µg) R I S Tetracycline T 30 ≤ 14 15 - 18 ≥ 19 Norfloxaxin NF 30 ≤ 12 13 - 17 ≥ 18 Colistin CL 10 ≤ 8 9 - 10 ≥ 11 Neomycin N 30 ≤12 13 - 16 ≥ 17 Penicillin P 10 ≤11 12 - 21 ≥ 22 Ampicillin AMP 10 ≤11 12 -13 ≥ 14 Streptomycin S 10 ≤11 12 - 14 ≥ 15 Enrofloxacin EF 30 ≤12 13 - 16 ≥ 17 Erythromycin ER 15 ≤13 14 - 17 ≥ 18 Kanamycin K 30 ≤13 14 - 17 ≥ 18
Phương pháp Bauer - Kirby dùng ñể ñánh giá tính mẫn cảm với kháng sinh của vi khuẩn mô tả bởi Carter và Cole (1990) ñược sử dụng trong thí nghiệm này. Môi trường tiêu chuẩn dùng ñể thử kháng sinh ñồ theo phương pháp Bauer - Kirby là môi trường Mueller - Hinton agar ñược chuẩn bị theo hướng dẫn của nơi sản xuất và ñược ñổ vào ñĩa petri ñảm bảo mặt thạch dày 4 mm. ðĩa thạch có ñường kính 10 cm cần ñổ 25 ml môi trường, ñĩa có ñường kính 15 cm ñổ 60 ml môi trường. Các ñĩa thạch ñược bao gói bảo quản ở nhiệt ñộ 4 - 80C, không quá 2 tuần, trước khi sử dụng ñể tủ ấm 10 - 20 phút. Vi khuẩn cần kiểm tra tính mẫn cảm với kháng sinh nuôi cấy trên môi trường lỏng Brain heart infusion. Dùng micropipet vô trùng chuyển 10 µl canh trùng lên mặt ñĩa thạch, dàn ñều, ñể yên trong thời gian 3 - 5 phút cho khô mặt thạch. Dùng panh ñặt và cố ñịnh các ñĩa giấy chứa kháng sinh cần kiểm tra sao cho các ñĩa giấy này tiếp xúc với mặt thạch và cách nhau không dưới 15mm, ñể yên 15 - 20 phút rồi lật úp ñĩa thạch, ủ ấm hiếu khí ở nhiệt ñộ 370C. ðọc kết quả sau 18 – 24 h bằng cách ño ñường kính vòng vô khuẩn. Kết quả này ñược so sánh với bảng tiêu chuẩn cho từng loại kháng sinh ñể ñánh giá mức ñộ mẫn cảm của vi khuẩn ñối với kháng sinh ñó.