- Hoạt tính enzyme (IU/ml) = AM F.
3.2.2.Ảnh hưởng của pH môi trường.
PHẦN III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.2.2.Ảnh hưởng của pH môi trường.
Hoạt ñộ của enzyme phụ thuộc vào pH của môi trường là vì pH ảnh hưởng ñến trạng thái oxy hóa gốc R của các gốc acid amin trong phân tử protein kể cả protein enzyme, ion hóa các nhóm chức trong trung tâm hoạt ñộng, ion hóa cơ chất. Do ñó yếu tố pH ảnh hưởng lớn ñến sự sinh trưởng, phát triển cũng như khả năng tổng hợp enzyme của xạ khuẩn.
Để sinh trưởng bình thường, phần lớn xạ khuẩn cần môi trường có pH trung tính hoặc hơi kiềm. Tuy nhiên tùy môi trường sống, pH tối thích của vi sinh vật cũng khác ñi. Trong các loại ñất chua người ta tìm thấy các xạ khuẩn ưa acid, chúng sinh trưởng tốt nhất ở pH 5.5 – 6.0 và không phát triển ñược ở pH khoảng 7.0 [32]. Để xét ảnh hưởng của yếu tố này lên các chủng xạ khuẩn chịu nhiệt phân lập trên ñống ủ vỏ cà phê, chúng tôi tiến hành nuôi cấy 7 chủng xạ khuẩn trên môi trường MT2, dùng NaOH 5%, HCl 5% ñể ñiều chỉnh pH của môi trường về các ñộ pH: 5.5; 6.0; 6.5; 7.0; 7.5; 8.0. Sau 5 ngày nuôi cấy, ly tâm thu enzyme và xác ñịnh hoạt tính enzyme cellulase theo phương pháp ñịnh lượng ñường khử DNS. Kết quả ñược ghi nhận ở bảng 3.4
49
Bảng 3.4. Ảnh hưởng của pH ñến hoạt tính enzyme của các chủng xạ khuẩn pH
Kí hiệu chủng
Hoạt tính enzyme cellulase (IU/ml)
5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 A2 0.201 0.193 0.146 0.114 0.115 0.085 C2 0.174 0.190 0.138 0.141 0.122 0.065 C3 0.191 0.165 0.183 0.176 0.181 0.138 C4 0.163 0.159 0.168 0.133 0.147 0.095 C6 0.189 0.204 0.227 0.237 0.260 0.239 C7 0.133 0.176 0.191 0.201 0.198 0.208 Ctm 0.104 0.143 0.135 0.161 0.146 0.131
Từ kết quả thu nhận ñược ở bảng 3.4 nhận thấy, pH tối ưu của các chủng nghiên cứu là khác nhau: C2 có pH tối ưu là 6,0; ; C3 là 5.5; C4 là 6.5; C6 là 7,5; C7 là 8,0 và 2 chủng ñối chứng Ctm là 7,0. A2 là 5.5. Điều này một lần nữa lại thể hiện sự ñặc thù của chủng giống.
Chủng C4, C6, C7 có hoạt tính của enzyme cellulase cao ở pH khá cao so với chủng xạ khuẩn phân giải cellulsose khác , từ 6,5 ñến 8,0. Đây là pH thích hợp của các chủng xạ khuẩn thuộc chi Steptomyces và chi Streptoverticillium.
Các kết quả này có ý nghĩa thống kê theo phân tích ANOVA. Điều này cho thấy pH có ảnh hưởng ñến hoạt tính của enzyme cellulase thông qua tác ñộng lên các gốc R của acide amin trong phân tử enzyme hoặc tác ñộng lên trung tâm hoạt ñộng của enzyme hoặc tác ñộng lên cơ chất.