- Hoạt tính enzyme (IU/ml) = AM F.
3.2.1.Ảnh hưởng của nhiệt ñộ
PHẦN III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.2.1.Ảnh hưởng của nhiệt ñộ
Bản chất hóa học của enzyme là protein nên khác với các phản ứng hóa học, vận tốc phản ứng do enzyme xúc tác chỉ tăng khi tăng nhiệt ñộ ở một giới hạn nhất ñịnh, chưa ảnh hưởng ñến cấu trúc của enzyme.
Đối với vi sinh vật, nhiệt ñộ là một trong những yếu tố ảnh hưởng rất lớn ñến sự sinh trưởng, phát triển cũng như ñối với hoạt tính của enzyme. Đối với vi sinh vật phân giải cellulose ưa ấm, thích hợp ở nhiệt ñộ 25 ñến 300C. Các chủng ưa nóng, nhiệt ñộ tốt nhất cho sự phát triển của chúng là 60 ñến 65 0C. Đa số xạ khuẩn thuộc loại ưa ấm, số xạ khuẩn thuộc loại ưa nhiệt ít gặp hơn. Do ñó ñể phân lập các chủng xạ khuẩn ưa nhiệt, nhiệt ñộ của môi trường phân lập ñược sử dụng là 450C. Để tiếp tục xác ñịnh ñặc tính ưa nhiệt của các chủng phân lập, nhiệt ñộ môi trường nuôi cấy ñược tăng dần lên: 500C, 550C, 600C, 650C.
47
Tiến hành nuôi cấy 5 chủng xạ khuẩn tuyển chọn và 2 chủng ñối chứng trên môi trường MT2, ủ ở 5 mức nhiệt ñộ khác nhau. Sau 5 ngày nuôi cấy, ly tâm thu enzyme và xác ñịnh hoạt tính theo phương pháp ñịnh lượng ñường khử DNS. Kết quả ñược ghi nhận ở bảng 3.3
Bảng 3.3: Ảnh hưởng của nhiệt ñộ ñến hoạt tính enzyme cellulase của các chủng xạ khuẩn tuyển chọn
Chủng xạ khuẩn
Hoạt tính enzyme cellulase (IU/ml)
450C 500C 550C 600C 650C A2 0.890 0.786 0.508 0.343 0.325 C2 0.731 0.827 0.771 0.540 0.569 C3 0.800 0.770 0.541 0.345 0.332 C4 0.892 0.850 0.653 0.540 0.550 C6 1.205 1.038 0.918 0.354 0.242 C7 0.974 0.693 0.530 0.326 0.321 Ctm 0.735 0.861 0.677 0.501 0.312
Kết quả ở bảng 3.3 cho thấy hoạt tính enzyme cellulase của chủng xạ khuẩn C3, C4, C6, C7 ở 450C cao hơn cả so với các nhiệt ñộ khảo sát, biến ñộng từ 0,800 IU/ml ñến 1.205 IU/ml, ñặc biệt là chủng C6. Chủng thương mại Ctm có nhiệt ñộ tối thích là 500C, tương ứng 0,861 IU/ml. Riêng chủng C2, mặc dù ở 500C enzyme có hoạt tính cao nhất nhưng có lẽ nhiệt ñộ tối thích còn biến ñộng do hoạt tính enzyme ở các ñiều kiện nhiệt ñộ cao hơn như 650C, hoạt tính enzym chưa giảm hẳn. Ở chủng A2 của tác giả Lệ Hà, hoạt tính ezyme tương ñương các chủng C3, C4, C6, C7.
Theo các nhà nghiên cứu, nhiệt ñộ hoạt ñộng thích hợp của nhiều enzyme vào khoảng 40 – 500C, trên 500C hoạt ñộ thường giảm mạnh do cấu trúc của
enzyme bị hỏng. Các enzyme có nguồn gốc thực vật và một số enzyme vi sinh vật có nhiệt ñộ tối thích cao hơn. Một số enzyme của vi sinh vật ưa nhiệt vẫn hoạt ñộng ở nhiệt ñộ 900C hoặc cao hơn [2].
Các kết quả này ñược xử lý thống kê theo phương pháp ANOVA cho thấy nhiệt ñộ ảnh hưởng ñến khả năng sinh tổng hợp enzyme cellulase có ý nghĩa.
Như vậy, hoạt tính của enzyme bị chi phối rất nhiều bởi ñặc thù của chủng giống