2.5.1. Cỡ mẫu và cỏch chọn mẫu của mục tiờu 1
- Cỡ mẫu: Số lượng hộ gia đỡnh cần điều tra thu thập mu i trong nghiờn cứu được tớnh toỏn theo cụng thức chọn mẫu của nghiờn cứu mụ tả với số mẫu hộ gia đỡnh tối thiểu tớnh theo cụng thức:
n: Cỡ mẫu hộ gia đỡnh
Z: Hệ số tin cậy với mức độ tin cậy 95%
P: Tỷ lệ hộ gia đỡnh phỏt hiện cú muỗi Aedes là 0,4 (40%). Theo bỏo cỏo của dự ỏn phũng chống SXHD quốc gia thuộc khu vực Miền Bắc, cỏc cuộc điều tra cho thấy vào mựa dịch trung bỡnh số hộ gia đỡnh ghi nhận cú muỗi Aedes(NCM) là 40%[5],[14].
d: Độ chớnh xỏc tuyệt đối mong muốn,chọn d= 4% (0,04)
Với cỏch chọn như trờn tớnh được n = 369 hộ gia đỡnh cho một đợt điều tra. Như vậy m i đợt, tại m i xó/phường sẽ điều tra 123 hộ gia đỡnh.
- Cỏch chọn mẫu:
+ Đơn vị mẫu là hộ gia đỡnh, khung mẫu là danh sỏch hộ gia đỡnh. Chọn hộ gia đỡnh bằng phương phỏp chọn mẫu ngẫu nhiờn hệ thống dựa trờn khung mẫu là danh sỏch hộ gia đỡnh được quản lý bởi chớnh quyền địa phương.
+ Tớnh toỏn khoảng cỏch mẫu (k) bằng cỏch lấy tổng số hộ (N) chia cho số hộ cần điều tra (n). Như vậy khoảng cỏch mẫu: k=N/n.
+ Hộ gia đỡnh đầu tiờn dựa trờn bảng số ngẫu nhiờn nhỏ hơn k. Hộ gia đỡnh thứ hai được chọn sẽ bằng thứ tự hộ gia đỡnh thứ nhất cộng cho hệ số thiết kế
55
(k), tương tự như vậy chọn cỏc hộ gia đỡnh tiếp theo cho đến khi đạt cỡ mẫu mong muốn.
2.5.2. Cỡ mẫu và cỏch chọn mẫu của mục tiờu 2
2.5.2.1. Vai trũ truyền bệnh SXHD của 2 loại mu i Aedes tại thực địa ổ dịch đang hoạt động
Đối với ổ dịch
- Cỡ mẫu:
M i mựa dịch (hàng năm) chọn khoảng 20 - 30 ổ dịch theo đỳng tiờu chuẩn.
- Cỏch chọn mẫu:
Đơn vị mẫu là ổ dịch SXHD. Chọn mẫu cú chủ đớch, thuận tiện theo tỡnh hỡnh diễn biến ổ dịch. M i mựa dịch (hàng năm) chọn khoảng 20 - 30 ổ dịch theo đỳng tiờu chuẩn. Chọn ổ dịch liờn tiếp theo diễn tiến mựa dịch cho đến khi lấy đủ số lượng mong muốn.
Đối với bệnh nhõn
- Cỡ mẫu:
Thu thập tất cả cỏc ca bệnh theo đỳng định nghĩa ca bệnh giỏm sỏt Sốt xuất huyết Dengue của Bộ Y tế.
- Cỏch chọn mẫu:
Đơn vị mẫu là bệnh nhõn mắc SXHD tại ổ dịch được chọn. Chọn toàn bộ ca bệnh trong cỏc ổ dịch đú.
Đối với muỗi
- Cỡ mẫu:
Toàn bộ mu i thu thập được tại cỏc nhà bệnh nhõn và cỏc nhà xung quanh nhà bệnh nhõn.
56
Đơn vị mẫu là hộ gia đỡnh. Chọn cỏc hộ gia đỡnh cú bệnh nhõn và xung quanh đú để tiến hành điều tra mu i cho đủ 50 hộ gia đỡnh/một ổ dịch.
2.5.2.2. Vai trũ truyền bệnh SXHD của 2 loại mu i Aedes bằng gõy nhiễm trong phũng thớ nghiệm
- Cỡ mẫu:
Số lượng mu i Aedes m i loài cần để gõy nhiễm thực nghiệm trong phũng thớ nghiệm được tớnh toỏn theo cụng thức chọn mẫu cho nghiờn cứu mụ tả với số mẫu mu i tối thiểu tớnh theo cụng thức:
n: Cỡ mẫu tối thiểu
Z: Hệ số tin cậy với mức độ tin cậy 95%
p: Tỷ lệ muỗi nhiễm vi rỳt Dengue sau gõy nhiễm thực nghiệm. d: Độ chớnh xỏc tuyệt đối mong muốn
+ Với cỏch chọn như trờn, đối với mu i Ae. aegypti theo tỏc giả Mourya., D và cs (2001) khả năng nhiễm vi rỳt Dengue sau gõy nhiễm là p = 0,61[61]; chọn d = 0,047; tớnh được n = 414.
+ Đối với mu i Ae. albopictus theo tỏc giả Tardieux và cs (1992) khả năng nhiễm vi rỳt Dengue sau gõy nhiễm là p = 0,38[74]; chọn d = 0,061; tớnh được n = 245.
- Cỏch chọn mẫu:
Đơn vị mẫu là mu i Ae. aegypti và mu i Ae. albopictus. Nhõn nuụi mu i trong phũng thớ nghiệm với khoảng 500 mu i Ae. albopictus và 1000 mu i
Ae. aegypti. Sau đú chọn ra những con mu i khỏe mạnh để tham gia nghiờn cứu sao cho vừa đủ số lượng mẫu mu i cần thiết cho nghiờn cứu.
57
2.6. Cỏch thức tiến hành nghiờn cứu
2.6.1. Cỏch thức tiến hành nghiờn cứu của mục tiờu 1 - Nhõn lực thu thập mu i và bọ gậy
M i nhúm điều tra cú từ 4-5 người. Hai người bắt mu i trưởng thành (một người bắt trong nhà và một người bắt ngoài nhà), từ 1-2 người bắt bọ gậy và 1 người dẫn đường địa phương.
- Thu thập mẫu mu i
Trước tiờn sử dụng mỏy hỳt mu i cầm tay do Bộ y tế cấp để thu thập mu i tại cỏc hộ gia đỡnh để tớnh chỉ số. Sau đú sử dụng mỏy hỳt đeo vai để thu thập toàn bộ mu i ở trong và ngoài nhà. M i hộ gia đỡnh thu thập mu i trong nhà và cả ngoài nhà (xung quanh dụng cụ chứa nước, vườn cõy) với thời gian 15 phỳt vào ban ngày. Mu i sau khi bắt được bảo quản trong ống tuýp để đảm bảo mu i sống và được vận chuyển ngay về ph ng thớ nghiệm Cụn trựng- Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương.
- Thu thập bọ gậy
Sử dụng bộ dụng cụ điều tra cụn trựng chuẩn của Tổ chức Y tế Thế giới để thu thập bọ gậy Aedes trong tất cả cỏc dụng cụ chứa nước của hộ gia đỡnh điều tra. Đối với cỏc dụng cụ chứa nước lớn như bể nước, thựng phi, chum, vại lớn, ghiếng nụng…dựng vợt cú đường kớnh 22cm để thu thập (vợt 5 vũng chuẩn và sau đú nhõn với hệ quy đổi theo thể tớch từng loài). Đối với cỏc DCCN nhỏ như cõy cảnh, bẫy kiến, mỏng ăn gia sỳc, gốc cõy…dựng pipet và gỏo lọc để thu thập toàn bộ bọ gậy. Đối với cỏc DCCN là phế thải hay lốp xe bắt bọ gậy bằng cỏch đổ ra thau, chậu và dựng pipet thu thập. Bọ gậy sau khi thu thập được bảo quản và được vận chuyển về ph ng thớ nghiệm Cụn trựng - Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương.
- Định loại mu i thu thập từ thực địa
Theo khúa định loại mu i ở Việt Nam của Chester J. Stojanovich và Harold Georye Scott.
58
- Xỏc định sự phõn bố của cỏc loài mu i Aedes theo từng loài, địa dư và theo thời gian
- Xỏc định sự phõn bố của cỏc loài mu i Ae. aegypti, Ae. albopictus (chi tiết xem phần biến số nghiờn cứu)