Tiến hành xét nghiệm phản ứng Pandy đối với DNT, phản ứng Rivalta với DMP và DMB. Thí nghiệm đƣợc tiến hành lặp lại 3 lần cho mỗi mẫu dịch nghiên cứu. Mẫu dịch đƣợc kết luận và đƣợc thống kê sử dụng trong nghiên cứu khi cả 3 lần lặp lại đều cho 1 kết quả (dƣơng tính hoặc âm tính).
- Phản ứng Pandy
Định nghĩa: Là phản ứng đánh giá sự rối loạn giữa tỷ lệ albumin và globulin trong DNT.
Nguyên lý: Khi lƣợng globulin trong DNT tăng sẽ bị kết tủa bởi thuốc thử Pandy (phenol bão hòa).
Chuẩn bị:
+ Dụng cụ: Lam kính, pipet nhỏ giọt, giá ống nghiệm, nền đen, ống nghiệm nhỏ, pipet 1ml, quả bóp.
+ Thuốc thử Pandy ( phenol bão hòa): Hòa tan 10 gam phenol (C6H5OH) trong 100 ml nƣớc cất. Lắc kỹ, để 2 - 3 ngày ở tủ ấm 37oC. Chuyển phần dịch trong sang 1 lọ khác để sử dụng.
Bệnh phẩm: DNT. Thao tác kỹ thuật:
Cho vào ống nghiệm nhỏ hoặc vào mặt lam kính 1ml thuốc thử Pandy, vài giọt DNT. Đọc trên nền đen:
+ Nếu hỗn hợp vẫn giữ nguyên màu trong suốt thì kết quả là âm tính. + Nếu có hiện tƣợng tủa khói trắng thì kết quả là dƣơng tính [2].
Định nghĩa: Phản ứng Rivalta là một trong những phản ứng dùng trong xét nghiệm sinh hoá để chẩn đoán phân biệt dịch với dịch tiết của một số loại dịch tràn nhƣ DMP, DMB.
Nguyên lý: Các dịch tiết có nhiều protein đặc biệt là fibrinogen bị kết tủa trong môi trƣờng acid acetic.
Thuốc thử: Acid acetic đậm đặc. Kỹ thuật tiến hành:
Cho vào cốc có chân hoặc ống đong 100 ml nƣớc cất, 1 giọt acid acetic đặc, trộn đều. Dùng pipet nhỏ nhẹ nhàng lên mặt dung dịch acid acetic vừa pha một vài giọt dịch chọc dò (DMP, DMB). Quan sát hiện tƣợng:
+ Nếu những giọt dịch chọc dò chìm xuống đáy cốc, vẩn đục trắng nhƣ khói thuốc lá thì phản ứng dƣơng tính.
+ Nếu dung dịch acid acetic vẫn trong thì phản ứng âm tính [2].