Sự đa hình protein trong các loại dịch chọc dò nghiên cứu

Một phần của tài liệu Nghiên cứu tính đa hình protein trong một số loại dịch chọc dò của người và tìm giới hạn phát hiện định lượng protein nhằm thay thế các phản ứng định tính (Trang 45 - 46)

Để xác định và đánh giá sự đa hình các protein trong DNT, DMP, DMB nghiên cứu chúng tôi tiến hành kiểm tra bằng điện di biến tính SDS-PAGE ở nồng độ gel 12,6%, bản điện di đƣợc hiện màu bằng Comassive Blue Brilliant R-250.

Từ kết quả phân tích khảo sát ban đầu, chúng tôi nhận thấy hàm lƣợng protein trong DNT rất thấp và không lẫn nhiều tạp chất nên chúng tôi xác định sự đa hình protein trong DNT chính là sự đa hình trong hệ protein toàn phần. Mặt khác, hàm lƣợng protein trong DMP, DMB rất cao và chúng chứa nhiều các thành phần khác ngoài protein dẫn đến khả năng phân tách khi điện di không rõ ràng. Việc loại bỏ các tạp chất này rất khó khăn khi dùng các phƣơng pháp thu protein tổng số. Chúng tôi nhận thấy khi dùng phƣơng pháp thu các protein bền nhiệt thì hầu hết các tạp chất đƣợc loại bỏ. Vì thế chúng tôi đánh giá sự đa hình protein trong hai loại dịch này thông qua sự đa hình protein của hệ protein bền nhiệt. Hệ protein bền nhiệt là một trong những đối tƣợng nghiên cứu mới trong nghiên cứu về protein. Cho đến nay vẫn chƣa có một định nghĩa chính xác và đầy đủ cho các protein loại này. Trong nghiên cứu này của chúng tôi, hệ protein bền nhiệt đƣợc xem nhƣ là tập hợp các protein có khả năng chịu đƣợc nhiệt độ,

vẫn giữ đƣợc hoạt tính sau khi đã đƣợc xử lý ở nhiệt độ 98o

C trong 10 phút. Tính bền nhiệt của các protein có mối quan hệ chặt chẽ với các cấu trúc tƣơng ứng của chúng. Ngoài ra, nó còn liên quan đến những cải biến và những biến đổi sinh hóa của protein nhƣ các quá trình glycosyl hóa [40]... Do đó, tính bền nhiệt của protein chắc chắn có những mối liên hệ nhất định với các biểu hiện bệnh lý. Nghiên cứu các protein bền nhiệt có thể giúp tìm ra những ứng viên chỉ thị bệnh hiệu quả và có độ nhạy cao.

Chúng tôi tiến hành thu nhận protein bền nhiệt từ hệ protein toàn phần DMP, DMB theo phƣơng pháp của Goufman và cs năm 2006 [33] rồi kiểm tra bằng điện di biến tính SDS-PAGE ở nồng độ gel 12,6%, bản điện di đƣợc hiện màu bằng Comassive Blue Brilliant R-250.

Một phần của tài liệu Nghiên cứu tính đa hình protein trong một số loại dịch chọc dò của người và tìm giới hạn phát hiện định lượng protein nhằm thay thế các phản ứng định tính (Trang 45 - 46)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(70 trang)