Hình 3.9. Điện di SDS-PAGE 12,6% protein toàn phần DNT
Đường chạy M: Thang protein marker chuẩn #SM0431; Đường chạy 1: DNT
âm tính Pandy và hàm lƣợng protein là 0,3 g/l; Đường chạy 2,3,4,5: DNT dƣơng tính Pandy và hàm lƣợng protein tƣơng ứng là 0,5; 0,6; 0,7; 0,8 g/l.
Kết quả điện di protein theo phƣơng pháp SDS-PAGE trên hình 3.9 cho thấy hệ protein trong DNT rất đa dạng. Số lƣợng băng (vạch) thu đƣợc dao động
từ 9 đến 10 băng với độ đậm nhạt khác nhau. Mẫu DNT có hàm lƣợng protein là 0,3 g/l và âm tính Pandy cho kết quả điện di xuất hiện 9 băng. Các mẫu còn lại có kết quả Pandy dƣơng tính với lƣợng protein từ 0,5 đến 0,8 g/l xuất hiện 10 băng. Trong đó mẫu DNT âm tính Pandy (1) xuất hiện 1 băng ở kích thƣớc khoảng 14,4 kDa trong khi cả 4 mẫu DNT dƣơng tính Pandy (2,3,4,5) đều không thấy có băng này. Ở các mẫu dƣơng tính Pandy thấy đều xuất hiện 1 băng ở kích thƣớc khoảng 20,5 kDa và 1 băng ở kích thƣớc dƣới 14,4 kDa nhƣng ở mẫu âm tính Pandy không thấy xuất hiện. Đây có thể là cơ sở cho việc tìm ra những chỉ thị phân tử protein cho chẩn đoán bệnh.
Bảng 3.7. Thống kê sự xuất hiện các băng điện di protein toàn phần DNT Khoảng kích
thƣớc kDa
Số lƣợng băng điện di xuất hiện ở các đƣờng chạy điện di 1 2 3 4 5 116 1 1 1 1 1 102,5 1 1 1 1 1 66,2 1 1 1 1 1 58,2 1 1 1 1 1 45 1 1 1 1 1 35 1 1 1 1 1 25 1 1 1 1 1 20,5 0 1 1 1 1 16 1 1 1 1 1 14,4 1 0 0 0 0 <14,4 0 1 1 1 1 Tổng 9 10 10 10 10
Kết quả từ hình 3.9 và bảng 3.7cho thấy giữa các mẫu dịch điện di thí nghiệm có sự khác nhau về số lƣợng, vị trí và độ đậm nhạt của các băng điện di chứng tỏ protein trong DNT nghiên cứu đã biểu hiện tính đa hình.
Hiện nay có rất nhiều các công trình nghiên cứu khoa học đã công bố về hệ protein huyết thanh làm căn cứ so sánh và chẩn đoán trong y học. Huyết thanh là một hệ protein khá toàn diện vì vậy chúng tôi tiến hành so sánh DNT nghiên cứu với huyết thanh ngƣời bình thƣờng thông qua kết quả điện di nhằm so sánh tìm ra cơ sở cho việc chẩn đoán khi sử dụng huyết thanh ngƣời bình thƣờng làm đối chứng.
Hình 3.10. Điện di SDS-PAGE 12,6% protein toàn phần dịch huyết thanh
Đường chạy M: Thang protein marker chuẩn #SM0431; Đường chạy 1: dịch
huyết thanh ngƣời bình thƣờng với hàm lƣợng protein tổng số là 74g/l.
Khi so sánh kết quả điện di protein DNT (hình 3.9) với kết quả điện di protein huyết thanh ngƣời bình thƣờng (hình 3.10) nhận thấy ở mẫu huyết thanh ngƣời bình thƣờng xuất hiện 1 băng khá đậm ở kích thƣớc trên 116 kDa và 1 băng ở kích thƣớc khoảng trên 35 kDa mà ở các mẫu DNT không thấy xuất hiện. Ngoài 2 băng trên thì ở mẫu huyết thanh xuất hiện các băng tƣơng tự nhƣ đối với mẫu DNT âm tính với xét nghiệm Pandy.