phổ HPLC-UV/Vis-MS
Hỗn hợp keo TiO2/chất màu nhạy quang sau khi thử nghiệm quang được chuyển vào ống ly tâm và ly tâm với tốc độ 6000 vòng/phút cho đến khi hạt TiO2-S sa lắng hoàn toàn. Dung môi không màu được tách ra bằng pipet Pasteur và tiếp tục bay hơi bằng thổi dòng nitrogen trực tiếp qua mẫu cho đến khi thu được chất rắn màu đỏ. Chất màu nhạy quang và sản phẩm sau phản ứng vẫn còn bám trên hạt TiO2 được tách bằng 400 µl dung dịch ly trích NaOH 0,1 M /Ethanol tỉ lệ thể tích 1:1. Dung dịch sau ly trích được trung hòa bằng axít formic (15 µl) và phân tích trên hệ sắc ký lỏng hiệu năng cao ghép khối phổ HPLC-ESI-MS.
Nguyễn Thái Hoàng
Không màu Màu đỏ
2
Hình 3. 3. Phổ hấp thụ UV -Vis của Aberchrome 540, (1) dạng không màu, hấp thụ UV
Thiết bị sắc ký lỏng hiệu năng cao ghép khối phổ này là một hệ thống liên hợp bao gồm: đầu dò UV/Vis (UV 6000 LP diode array), đầu dò MS-ESI (LCQ – Deca ThermoFinnigan, ion hóa bằng kỹ thuật phun tĩnh điện), hệ thống lấy mẫu tự động (AS3000), hệ thống bơm (P4000) và máy chân không. Cột phân tích sử dụng là loại cột sắc ký pha đảo (50 mm Xterra MS RP C18). Hệ thống thiết bị được chú thích trên hình 3.4.
Điều chỉnh bước sóng hấp thụ của dung dịch qua cột trong khoảng 200 – 800 nm. Đầu dò MS-ESI đuợc thiết lập chế độ lọc ion dương đơn điện tích (z = +1) với khoảng quét m/z = 400 – 800 nm, nhiệt độ mao quản 250oC. Phần mềm LCQ Xcalibur1.2 được dùng để phân tích sắc ký đồ và khối phổ đồ. Chế độ rửa giải được tóm tắt trong bảng 3.1.
Bảng 3.1. Chế độ rửa giải trong các thí nghiệm phân tích sản phẩm phản ứng bằng thiết bị HPLC-UV/Vis-MS.
Thời gian (phút) (Tốc độ dòng rửa giải:
0,2 ml/phút)
ACN (%) Hỗn hợp dung môi (1% axit formic + 5% ACN +
94% H2O) 0 0 100 21,6 100 0 35 100 0 45 100 0 55 0 100
Hình 3. 4. Hệ phân tích sắc ký lỏng hiệu năng cao ghép khối phổ (HPLC-UVvis-ESI-MS)