- Mô hình vn đánh giá kh nng đi kháng c a các ch ng Trichoderma tri n v ng đ
Ni dun g
2.4.1 Nghiên cu in-vitro tác đ ng ca các dinh dng khoáng N, P, K, Ca và Mg lên s phát tri n và hình thành bào t c a Trichoderma
Các thí nghi m đ c ti n hành trong đi u ki n in-vitro nh m kh o sát nh h ng c a các lo i khoáng N, P, K, Ca và Mg lên s sinh tr ng và phát tri n c a các ch ng Trichoderma. K t qu đ t đ c dùng làm c s cho các ng d ng nhân dòng các ch ng Trichoderma có b sung dinh d ng khoáng
đ t ng hi u qu s d ng. Thí nghi m đã đ c th c hi n trên môi tr ng PDA và PDB có b sung dinh d ng khoáng, g m có:
* Trên môi tr ng PDA (potato dextrose agar)
Hai ch ng Trichoderma T-BM2a (t ng tr ng nhanh, sinh bào t ch m) và T-OM2a (t ng tr ng ch m, sinh bào t nhanh) đ c nuôi c y tr c 7 ngày trên môi tr ng PDA (200 g khoai tây, 20 g dextrose, 20 g agar, n c c t v a đ 1.000 ml), sau đó thu l y khoanh khu n l c ( = 5 mm) và c y vào gi a đ a petri (ch a 10 ml môi tr ng) c a môi tr ng PDA có thêm các dinh d ng khoáng và đ trong đi u ki n nhi t đ phòng (24 - 290C).
Kh n ng phát tri n c a 2 ch ng n m đ c đánh giá qua đ ng kính khu n l c ghi nh n 2 ngày và s l ng bào t 7 ngày sau khi nuôi c y qua lam đ m (hi u Malassez).
* Trong môi tr ng PDB (potato dextrose broth)
Hai ch ng Trichoderma T-BM2a và T-OM2a đ c nuôi c y tr c trên môi tr ng PDA 7 ngày đ thu th p bào t . Cho 1 ml huy n phù bào t
Trichoderma (m t s 2 x 107 bào t /ml) vào bình tam giác ch a 200 ml môi tr ng PDB (200 g khoai tây, 20 g dextrose, n c c t v a đ 1.000 ml) có thêm các dinh d ng khoáng. L c t c đ 125 vòng/phút trong 7 ngày đi u ki n phòng (nhi t đ 28 - 310C).
M t s bào t Trichoderma đ c xác đ nh qua lam đ m Malassez. Sinh kh i n m đ c thu qua gi y l c (Whatman # 5) và s y khô 1050C trong 8 gi .
C hai thí nghi m đ u đ c b trí theo th th c hoàn toàn ng u nhiên, 5 l n l p l i thí nghi m 1 và 4 l p l i thí nghi m 2, g m 2 nhân t :
- Nhân t A: Các d ng dinh d ng khoáng ch a N (d ng (NH4)2SO4, NH4NO3 và CO(NH2)2; n ng đ 28; 56 và 112 mmol), h p ch t P và K (KH2PO4, n ng đ K+ 2; 4 và 8 μmol), Ca (CaSO4; n ng đ 0,625; 1,25 và 2,5 mmol) và Mg (MgSO4; n ng đ 8; 16 và 32 μmol)
- Nhân t B: Hai ch ng Trichoderma T-BM2a và T-OM2a.
2.4.2 Tìm hi u tác đ ng c a dinh d ng đ t (N, P, K) đ n kh n ng đ i kháng c a Trichoderma đ i v in m b nh F. solani