Cn = Cn0 + V0 x Cn-
3.1.Xây dựng đƣờng chuẩn của metformin hydroclorid trong dung dịch đệm phosphat pH 6,8 tại bƣớc sóng 232nm.
phosphat pH 6,8 tại bƣớc sóng 232nm.
3.1.1. Phổ UV của dung dịch metformin hydroclorid trong môi trường đệm phosphat pH 6,8.
Khi tiến hành quét phổ của dung dịch metformin hydroclorid có nồng độ 5µg/ml trong môi trường đệm phosphat pH 6,8 trong khoảng bước sóng 200 – 400nm thu được kết quả λmax = 232nm. (Phụ lục 1)
3.1.2. Xây dựng đường chuẩn biểu diễn mối quan hệ giữa mật độ quang và nồng độ metformin hydroclorid trong dung dịch đệm phosphat pH 6,8 ở bước sóng 232nm.
Cách tiến hành: Pha một dãy các dung dịch metformin hydroclorid có nồng độ 1; 2; 4; 6; 8; 10 (µg/ml) trong môi trường đệm phosphat pH 6,8. Đo mật độ quang của các dung dịch này tại bước sóng 232nm thu được kết quả như sau:
Bảng 4:Mật độ quang của dung dịch metformin hydroclorid tại các nồng độ khác nhau
Nồng độ (µg/ml) 1,001 2,002 4,004 6,006 8,008 10,01 Mật độ quang (D) 0,085 0,170 0,321 0,481 0,644 0,793
Hình 3: Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc của mật độ quang vào nồng độ dung dịch metformin hydroclorid trong dung dịch đệm phosphat pH 6,8
y = 0.078x + 0.008R² = 0.999 R² = 0.999 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 0 2 4 6 8 10 12 mậ t độ quang nồng độ(µg/ml)
* Nhận xét: Kết quả khảo sát cho thấy: giữa mật độ quang đo được ở bước sóng 232nm và nồng độ dung dịch metformin hydroclorid có sự phụ thuộc khá chặt chẽ trong khoảng khảo sát với hệ số tương quan R2
~ 1, như vậy có sự tương quan tuyến tính giữa nồng độ dung dịch metformin hydroclorid và mật độ quang. Do đó có thể dùng bước sóng = 232 nm để đo mật độ quang của dung dịch metformin hydroclorid để xác định nồng độ metformin hydroclorid trong phép thử độ hòa tan.