3. Dung dịch EDTA (etylen diamin tetraaxetic axit): (0,5M; pH 8,0; 100 ml)
15.3.7. Điều chỉnh thiết bị điện d
Bể chắn mẫu. Để cho gel đặc lại tối thiểu là 30 phút và giữ ở nhiệt độ phịng trước khi tháo lược.
Khi tháo lược giữ ở cạnh ngắn và nâng nhẹ để tránh gẫy gel.
Giữ để khơng hỏng bể chứa, dùng pipet để lấy mẫu, cố gắng cho vào giữa bể và khơng làm thủng đáy bể.
Mẫu thử khơng chạy dọc theo cột
Nếu chảy thành sợi trên khay bị hỏng thì phải thay thế. Giảm điện áp.
Chọn chất đệm với nồng độ và hàm lượng dung dịch đệm thích hợp (lượng dung dịch đệm TBE chứa nhiều hơn loại TAE).
Nếu chất đệm bị tháo ra hết thì ngưng hoạt động, tháo nắp, dùng ống hút lấy chất đệm từ lỗ khác cho vào bên trong lỗ đối diện đến khi đầy chất đệm.
Nếu chất gel khơng đồng nhất, đặt khuơn đúc nằm ngang trước khi đổ dồn gel (để làm hồ lẫn vào nhau).
Cặp khuơn đúc
Lược phải đặt thẳng đứng để tránh làm biến dạng bể chứa.
Giảm lớp đệm 1 mm từ bề mặt ở phía trên gel, giảm gradien nhiệt độ.
Tái tạo gel khơng đủ chất lượng
Thêm ficoll, glyxerol hay đường (mía) vào nhiều dung dịch lấy mẫu để bảo đảm mẫu lắng xuống đáy bể (chọn chất ficoll)
Chắc chắn mẫu thử được hồ tan hồn tồn. Giảm điện thế.
Giảm nồng độ mẫu thử. Giảm thể tích mẫu.
Cần ít nhất 1 mm gel dưới đáy lược để tránh mẫu rỉ ra từ đáy bể. Giảm nồng độ muối trong mẫu thử.
Kiểm tra độ enzim, mẫu thử cĩ thể cần tác động lâu (xúc tác xảy ra quá trình) và một loại chất đệm khác hạn chế sự di chuyển.
Pha chế mẫu mới nếu nghi ngờ mẫu bị nhiễm bẩn. Chọn loại agaroza với tốc độ thẩm thấu chậm. Đặt khay đúng vị trí, khơng ấn mạnh vào bên trong.
332
Chương 16