Mục đích cấy chuyền giống từ mơi trường cấp 1 sang mơi trường nhân giống cấp 2 giúp giống thích dần với mơi trường nghèo dinh dưỡng hơn và giúp giống khoẻ hơn trước khi cấy chuyền sang mơi trường mùn cưa. Đồng thời làm tăng lượng giống để cấy sang mơi trường mùn cưa.
Mơi trường hạt sau khi hấp trử trùng ở nhiệt độ 121oC trong thời gian 60 phút, để nguội và tiến hành cấy chuyền giống nấm từ mơi trường thạch sang mơi trường hạt trong tủ cấy vơ trùng. Sau 2 ngày, những lọ thuỷ tinh đã thấy cĩ hiện tượng bung tơ. Tiếp tục theo dõi hệ sợi phát triển, và đo đạc ta được bảng 3.2. Tốc độ phát triển hệ sợi của các giống nấm trên mơi trường hạt được khảo sát 3 ngày/ lần cho đến khi tơ nấm lan kín lọ thủy tinh.
Trên mơi trường nhân giống nhân giống cấp 2, ở 3 ngày hệ sợi nấm Linh chi lan sâu vào khối cơ chất trong lọ thủy tinh với tốc độ tương đối chậm nhưng đồng đều mọi phía. Lúc cịn non sợi nấm cĩ màu trắng đục, sau 12 – 13 ngày hệ sợi lan hết khối cơ chất trong lọ thủy tinh. Mật độ hệ sợi tăng dần theo thời gian. Trong quá trình sinh trưởng hệ sợi nấm, thấy xuất hiện những đốm sắc tố màu đen – nâu ở bề mặt ngồi lọ thủy tinh. Tốc độ lan hệ sợi nấm đo được thể hiện trong bảng 3.2
Kết quả thống kê cho thấy chiều dài hệ sợi nấm Linh chi cĩ sự khác biệt rất cĩ ý nghĩa (p<0,01) giữa các mơi trường nhân giống cấp 2 sau: 3 NSC, 6 NSC, 9 NSC, 12 NSC.
Bảng 3.2: Ảnh hưởng của mơi trường nhân giống cấp 2 đến chiều dài của tơ nấm Linh
chi trên mơi trường nhân giống cấp 2 (cm)
Nghiệm Thời gian theo dõi
Thức 3NSC 6NSC 9NSC 12NSC L 90%+MC5%+ CG5% 2,33 e 3,75 e 5,12 f 6,53 f L 90%+CB5%+ CG5% 2,53 e 4,72 d 6,25 d 7,75 e L 90% + CG 10% 3,38 ab 5,25 c 6,84 c 8,57 d L 75%+MC20%+ CG5% 2,95 c 3,90 e 5,53 e 7,38 e L 75%+MC15%+ CB5%+ CG5% 3,56 a 4,84 d 5,82 e 7,62 e
L75%+CB5%+CB10% 3,63 a 3,63 e 4,76 g 7,32 e L50%+MC40%+CB15%+CG5% 2,48 de 5,08 cd 6,42 d 9,12 c L 50%+MC35%+CB5%+CG10% 2,67 d 4,74 d 5,47 e 8,45 d L 50% +MC 50% 3,24 b 6,57 a 8,24 a 12,46 a L 100%(Đ/c) 3,2 bc 5,94 b 7,56 b 10,54 b CV(%) 3,65 3,07 2,40 2,72 Ftính 55,76** 120,71** 163,46** 171,54**
Ghi chú: Trong cùng một cột, các số liệu cĩ cùng ký tự đi kèm khác biệt khơng cĩ ý nghĩa thống kê; ns: khác biệt khơng cĩ ý nghĩa thống kê; **: khác biệt rất cĩ ý nghĩa thống kê mức 0,01; *: khác biệt cĩ ý nghĩa thống kê mức 0,05
Ở 3 NSC, chiều dài lan tơ nấm của NT lúa 75%+cám bắp 15%+cám gạo 10% và NT lúa 75%+mùn cưa cao su 15%+cám bắp 5%+cám gạo 5% là dài nhất, chiều dài tơ nấm lần luợt là 3,63cm và 3,56 cm. NT lúa 90%+mùn cưa cao su 5%+cám gạo 5% chiều dài tơ nấm ngắn hơn so với các nghiệm thức cịn lại (2,33cm).
Ở 6 NSC, trên các mơi trường nhân giống cấp 2 chiều dài tơ nấm biến động từ 3,63 – 6,57 cm. NT lúa 50%+mùn cưa cao su 50% cĩ chiều dài tơ nấm dài nhất (6,57 cm). NT lúa 90%+mùn cưa cao su 5%+cám gạo 5% cĩ chiều dài tơ nấm là ngắn nhất (3,75 cm). NT lúa 100% (Đ/c) chiều dài lan tơ đạt 5,94 cm, chỉ ngắn hơn so với NT lúa 50%+mùn cưa cao su 50% nhưng đều dài hơn các nghiệm thức cịn lại, cĩ sự khác biệt rất cĩ ý nghĩa thống kê (p<0,01).
Ở 9 NSC, chiều dài tơ nấm NT lúa 50%+mùn cưa cao su 50% là dài nhất (8,24 cm), dài hơn so với NT Đ/c ( 7,56 cm). NT lúa 90%+mùn cưa cao su 5%+cám gạo 5% chiều dài tơ nấm là ngắn nhất (6,53 cm).