2. Mục tiêu nghiên cứu của đề tài
3.1.5.Kết quả nghiên cứu đảm bảo chất lượng kết quả thử nghiệm của kit
Từng lô mẫu khi phân tích, bố trí thí nghiệm mẫu mù gồm mẫu trắng, mẫu dương tính, mỗi loại 1 mẫu, người khác chuẩn bị để người phân tích không biết thông tin về mẫu. Tiến hành phân tích định tính bằng ELISA, sau đó khẳng định lại bằng kỹ thuật phân tích LC/MS/MS.
Bảng 3.6: Kết quả kiểm tra mẫu mù Lần thực hiện Mã số mẫu Bố trí
Phân tích sàng lọc Elisa Phân tích khẳng định LCMSMS
Kết quả Đánh giá Kết quả Đánh
giá Salbutamol Clenbuterol Lần 1 Mẫu 1 - - Đạt - - Đạt Mẫu 2 + + Đạt + + Đạt Lần 2 Mẫu 1 - - Đạt - - Đạt Mẫu 2 + + Đạt + + Đạt
Kết quả ở bảng 3.6 cho thấy:
+ Kết quả phân tích định tính (sàng lọc): Mẫu trắng cho kết quả âm tính; mẫu dương tính cho kết quả dương tính trong phân tích định tính. Kết quả này phù hợp với thí nghiệm được bố trí.
+ Kết quả phân tích định lượng: Mẫu trắng cho kết quả âm tính; mẫu dương tính cho kết quả dương tính với salbutamol và/hoặc clenbuterol. Kết quả này phù hợp với thí nghiệm được bố trí.
+ Đánh giá kết quả: Từ kết quả phân tích định tính bằng ELISA và kết quả phân tích định lượng bằng LC/MS/MS thấy: mẫu mù bố trí là mẫu trắng đã cho kết quả âm tính; mẫu mù bố trí là mẫu thêm chuẩn đã cho kết quả dương tính.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 53 Trên cơ sở nghiên cứu tính ổn định, giới hạn phát hiện, khả năng phát hiện, độ đặc hiệu, độ chính xác, độ nhạy, độ lệch dương, độ lệch âm và kết quả nghiên cứu đảm bảo chất lượng kết quả thử nghiệm của kit ELISA, đưa ra kết luận: kit ELISA β- agonists của hãng Biooscientific (MaxSignalTM β-agonist, mã 1009) trong điều kiện phòng thử nghiệm ở Việt Nam hoàn toàn đáp ứng được yêu cầu của một phương pháp phân tích định tính quy định trong quyết định 657/2002/EC với:
Khả năng phát hiện (CCβ) là 0,1 µg/kg Độ chính xác (AC): 95% (AC ≥ 90%) Độ đặc hiệu (SP): 95% (SP ≥ 90%) Độ nhạy (SE) : 95% (SE ≥ 90%) Độ lệch dương (PD) : 5% (PD ≤ 10%) Độ lệch âm (ND) : 5% (ND ≤ 10%).
3.2. Kết quả nghiên cứu phương pháp LC/MS/MS dùng cho phân tích định lượng xác định β-sgonists trong thịt lợn