nhau tới chất lượng protoplast sau quỏ trỡnh dung hợp.
Ở thớ nghiệm này nồng ủộ của PEG quyết ủịnh sự thành cụng của thớ nghiệm dung hợp. Nếu nồng ủộ PEG quỏ cao thỡ sẽ dẫn ủến kết quả là cỏc protoplast kết dớnh thành cụm dày ủặc, bị vỡ và rất khú rửa sạch. Ngược lại nếu nồng ủộ quỏ thấp thỡ khụng ủủ kớch thớch sự kết dớnh của 2 protoplast. Trong thớ nghiệm này chỳng tụi xử lý hỗn hợp protoplast của 2 dũng nhị bội (B186 và B208) trong cựng 1 thời gian 3 phỳt ở cỏc nồng ủộ PEG từ cao xuống thấp, kết quả thu ủược như sau:
Hỡnh 9: Kết quả dung hợp protoplast của hai dũng B208 và B186 bằng hoỏ chất PEG ở cỏc nồng ủộ khỏc nhau trong cựng thời gian ủ PEG 3 phỳt.
Nhỡn vào hỡnh ảnh ta nhận thấy sau quỏ tỡnh dung hợp, ta cú thể nhận thấy sự ảnh hưởng rừ rệt của cỏc nồng ủộ PEG khỏc nhau tới chất lượng của Protoplast sau dung hợp.
PEG 40% PEG 30%
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nụng nghiệp……… 54
- Ở PEG 40% thỡ PEG khú rửa sạch và cỏc protoplast sau dung hợp kết dớnh chặt với nhau thành mảnh lớn. Sự kết tụ thành ủỏm Protoplast lớn này làm hiệu suất dung hợp kộm ủồng thời dẫn ủến sự dung hợp ủa protoplast, bờn cạnh ủú PEG khú rửa sạch hơn và sút lại trong mụi trường nuụi gõy ngộ ủộc tế bào, làm vỡ tế bào.
- Với PEG 30% cỏc protoplast vẫn kết dớnh thành những từng mảnh lớn nhưng lượng tế bào kết dớnh và lượng ptotoplast bị vỡ trong quỏ trỡnh dung hợp ớt hơn so với PEG 40%.
- Ở nồng ủộ PEG 25% hầu như PEG ủược rửa sạch nhưng số tế bào chập 3 nhiều, cỏc protoplast vẫn kết dớnh thành những ủỏm nhỏ.
- So với cỏc nồng ủộ PEG trờn thỡ PEG 22,5% cho tỷ lệ cỏc tế bào dớnh thành từng ủỏm ớt hơn so với cỏc tế bào dớnh thành ủụi hay ba, protoplast sau dung hợp ớt bị vỡ hơn, và PEG ủược rửa sạch.
Vỡ vậy PEG 22,5% thớch hợp nhất cho dung hợp protoplast khoai tõy và dựng nú cho cỏc thớ nghiệm dung hợp tiếp theo.