Dựa trờn cỏc biểu hiện di truyền, sử dụng cỏc gene chỉ thị hoặc gene

Một phần của tài liệu bước đầu nghiên cứu kỹ thuật tách, nuôi cấy protoplast khoai tây diploid phục vụ chương trình tạo giống khoai tây bằng dung hợp tế bào trần (Trang 36 - 37)

gene ủỏnh dấu

Chẳng hạn như cỏc gene ủột biến gõy bạch tạng, cỏc ủột biến hoỏ sinh gõy thiếu hụt enzyme như nitrat reductase (NR), cỏc gene ủỏnh dấu cú ủược nhờ phương phỏp chuyển gene, cỏc gene khỏng sinh hoặc khỏng chất diệt cỏ, …. Vớ dụ về cỏc trường hợp sử dụng biểu hiện biến ủổi di truyền:

Khi nuụi cấy tế bào lai trong mụi trường thiếu hoocmon ngoại sinh, cỏc tế bào lai cú khả năng tạo mụ sẹo và tỏi sinh cõy trong khi cỏc tế bào bố mẹ khụng cú khả năng này (Power 1977, Shenck 1982).

Cocking (1977) dung hợp protoplast giữa cỏc loài ủột biến thuộc hai loài Petunia hybridap. parodii. Protoplast từ dạng ủột biến bạch tạng của

Trường ðại hc Nụng nghip Hà Ni – Lun văn thc s khoa hc nụng nghip……… 29

P. hybrida cho mụ sẹo màu trắng, protoplast của P.paradii khụng tạo mụ sẹo, tế bào lai cho mụ sẹo màu xanh.

Masson (1989) và Thomas (1990) ủó sử dụng biến nạp gene chọn lọc cho cả hai dạng bố mẹ, một dạng ủược gắn kanamycine cũn một dạng ủược gắn gene khỏng hydromycin. Việc chọn lọc sản phẩm dung hợp ủược tiến hành trờn mụi trường cú chứa cả hai chất khỏng sinh kanamycin và hydromycin.

Nếu một trong hai bố mẹ là kiểu ủột biến sinh dưỡng, vớ dụ: thiếu enzyme NR khụng thể sống trờn mụi trường cú chứa NO3- do khụng chuyển hoỏ ủược NO3- =>NO2- =>NH3, cũn dạng kia ủược chuyển gene kiểm soỏt một tớnh trạng trội (như gene khỏng chất diệt cỏ hoặc chất khỏng chất khỏng sinh) thỡ ta cú thể chọn lọc cỏc tế bào lai trực tiếp trờn mụi trường tối thiểu cú bổ sung chất khỏng sinh hoặc chất diệt cỏ. Phương phỏp này ủó ủược ỏp dụng trờn ủối tượng cõy thuốc lỏ và cõy cải dầu.

Một phần của tài liệu bước đầu nghiên cứu kỹ thuật tách, nuôi cấy protoplast khoai tây diploid phục vụ chương trình tạo giống khoai tây bằng dung hợp tế bào trần (Trang 36 - 37)