Tính đặc hiệu và nồng độ IgY trong dịch kháng thể tinh sạch từ lòng đỏ trứng được xác định bằng phương pháp ELISA. Từ kết quả hiệu giá ngưng kết vi khuẩn của IgY tinh sạch, trong thí nghiệm này chúng tôi tiến hành kiểm tra dịch kháng ở các độ pha loãng 1/100, 1/1000 và 1/10000, mỗi nồng độ lặp lại 2 lần. Đối chứng âm gồm có: Đối chứng âm 1 là PBS, đối chứng âm 2 là vi khuẩn Vibrio sp. P1 (để khẳng định tính đặc hiệu của dịch IgY). Kết quả dương tính là các giếng chuyển từ không màu sang màu xanh lá cây (green), các mẫu không sang màu xanh lá cây là mẫu âm tính.
Hình 3.4. Kết quả ELISA ở các nồng độ pha loãng IgY. Các nhóm giếng A1 và B1, A2 và B2, A3 và B3 có nồng độ kháng thể pha loãng tương ứng là 1/100, 1/1000 và 1/10000; các giếng A4 và B4: đối chứng 2 (Vibrio sp. P1); cácgiếng A5 và B5: đối chứng
Theo kết quả trên Hình 3.4, các giếng đối chứng 1 và đối chứng 2 đều cho kết quả âm tính, các nồng độ kháng thể 1/100 (Giếng A1 và B1) và 1/1000 (Giếng A2 và B2) cho kết quả dương tính (có sự chuyển màu của dung dịch trong giếng từ không màu sang màu xanh lá cây), ở nồng độ pha loãng IgY 1/10000 cho kết quả âm tính (không có sự chuyển màu). Kết quả này khẳng định tính đặc hiệu của kháng thể IgY tinh sạch với vi khuẩn S. iniae. Tuy nhiên, do nguyên nhân khách quan chúng tôi không thực hiện được việc đọc kết quả ELISA trên máy, điều này có thể dẫn tới việc xác định nồng độ kháng thể cho kết quả dương tính chưa chính xác (không phát hiện được sự chuyển màu bằng mắt thường ở nồng độ pha loãng 1/10000). Chính vì vậy, chúng tôi tiến hành kiểm tra thêm bằng phương pháp Dot blot (phương pháp dựa trên nguyên tắc của ELISA nhưng đọc kết quả bằng mắt) để khẳng định.