3. Đối t−ợng, nguyên liệu, nội dung và ph−ơng pháp nghiên cứu
3.4.1.Ph−ơng pháp lấy mẫu Ph−ơng pháp lấy mẫu :
Ph−ơng pháp lấy mẫu:
Tất cả các mẫu phân đ−ợc lấy trực tiếp trong trực tràng hoặc lấy ngay sau khi chó mới thải phân. Mẫu phân lấy đ−ợc chứa trong syringe vô trùng (tr−ờng hợp mẫu phân loãng có nhiều n−ớc) và bằng lọ thủy tinh vô trùng có nút bông ( tr−ờng hợp mẫu phân bình th−ờng và phân có nhiều dịch nhầy khó hút).
- Mẫu phân chó bị viêm ruột tiêu chảy thể cấp tính: lấy phân ngay trong ngày đầu khi chó bắt đầu bị tiêu chảy, ch−a điều trị bằng kháng sinh.
- Mẫu phân chó bị viêm ruột tiêu chảy thể mạn tính: lấy phân của những chó mắc bệnh kéo dài từ ngày thứ 10 trở đi.
Ph−ơng pháp xử lí mẫu:
Mẫu lấy về nếu ch−a kịp xử lí ngay sẽ đ−ợc bảo quản ở nhiệt độ 4o
C. Xử lí mẫu: mẫu lấy về cấy chuyển ngay vào môi tr−ờng n−ớc thịt, đặt trong tủ ấm 37o
môi tr−ờng phân lập.
Ph−ơng pháp nuôi cấy vi khuẩn:
Cân 1gram phân cho vào ống nghiệm vô trùng nghiền nát với 9 ml n−ớc sinh lí ta đ−ợc độ pha loãng 10-1
, dùng syringe vô trùng trộn đều nhiều lần. Sau đó hút 1ml dung dịch này sang ống thứ 2 đựng 9 ml n−ớc sinh lí vô trùng, trộn đều, tiếp tục làm nh− vậy đến nồng độ pha loãng thích hợp để nuôi cấy.
Cách nuôi cấy: dùng syringe vô trùng hút 0,1 ml dịch pha loãng ở các nồng độ đã chọn vào một đĩa môi tr−ờng. Mỗi nồng độ ở mỗi môi tr−ờng cấy trên ba đĩa lồng. Cấy bằng ph−ơng pháp láng đều dịch pha loãng trên bề mặt thạch. Sau đó để các đĩa thạch vào tủ ấm 370C/24 giờ.