Sắc ký lỏng hiệu năng cao (High Performance Liquid Chromatography- HPLC) đôi khi còn được gọi là sắc ký lỏng áp suất cao (High Pressure Liquid Chromatography) là kỹ thuật phân tích dựa trên cơ sở sự phân tích các chất trên một pha tĩnh chứa trong cột, nhờ dòng di chuyển của pha động lỏng dưới áp suất cao. Sắc ký lỏng dựa trên cơ chế hấp phụ, phân bố, trao đổi ion hay
ĐỖ CAO VINH 21
loại cỡ là tùy thuộc vào pha tĩnh sử dụng. Trong đó, sắc ký phân bố được sử dụng rộng rãi và phổ biến. Tùy theo độ phân cực của pha tĩnh và dung môi pha động người ta phân biệt sắc ký pha thường và sắc ký lỏng pha đảo. [15]
Sắc ký pha thường: pha tĩnh có độ phân cực cao hơn độ phân cực của dung môi pha động, dùng để tách và phân tích các hợp chất có độ phân cực cao với phân tử lượng không lớn lắm. [15]
Sắc ký lỏng pha đảo: ngược với sắc ký pha thường, pha tĩnh có độ phân cực thấp, pha động có độ phân cực cao hơn. Phương pháp này dùng để phân tích các hợp chất từ không phân cực đến phân cực vừa. Dung môi sử dụng là dung môi phân cực, trong đó nước đóng vai trò quan trọng mà lại rẽ tiền, do đó sắc ký lỏng pha đảo được sử dụng phổ biến nhất. [15]
Khi phân tích sắc ký các chất được hòa tan trong dung môi thích hợp và hầu hết sự phân tách đều xãy ra ở nhiệt độ thường. Chính vì thế mà các thuốc không bền với nhiệt không bị phân hủy khi phân tích sắc ký. Sắc ký thường được hoàn thành trong một thời gian ngắn (khoảng 30 phút). Chỉ những thành phần có hệ số chọn lọc khác nhau mới có thể phân tích bằng HPLC. Ngày nay HPLC đã và đang được sử dụng nhiều trong lĩnh vực phân tích hóa học nói chung cũng như trong kiểm tra chất lượng thuốc và phân tích sinh dược học nói riêng. [15]