- Động vật thí nghiệm: Chuột nhắt trắng chủng Swiss, cả hai giống, khỏe mạnh, trọng lƣợng từ 18-22g. Chia ngẫu nhiên thành 6 lô, mỗi lô 10 con.
Lô 1 ( đối chứng): uống nƣớc cất 0,2mg/10g TT chuột. Lô 2 (chứng dƣơng): uống prenisolon với liều 10mg/kg TT.
Lô 3 (cao ethanol liều thấp): uống cao chiết ethanol (liều tƣơng đƣơng lâm sàng) 2,11g cao/kg TT TT/ngày với thể tích 0,2 ml/10g TT.
Lô 4 (cao ethanol liều cao): uống cao chiết ethanol (liều gấp 3 lần liều tƣơng đƣơng lâm sàng) 6,33g cao/kg TT TT/ngày với thể tích 0,2 ml/10g TT.
Lô 5 (cao nƣớc liều thấp): uống cao sắc nƣớc (liều tƣơng đƣơng lâm sàng) 3,54g cao/kg TT TT/ngày với thể tích 0,2 ml/10g TT.
Lô 6 (cao nƣớc liều cao): uống cao sắc nƣớc liều cao (liều gấp 3 lần liều tƣơng đƣơng lâm sàng) 10,62g cao/kg TT TT/ngày với thể tích 0,2 ml/10g TT.
- Tác nhân gây u hạt trên chuột là sợi amiant trọng lƣợng 6mg đã tiệt trùng và tẩm Carrageenin 1%.
Cách tạo hạt: Mẩu sợi amiant đƣờng kính mặt cắt khoảng 2mm đƣợc vê tròn và sấy tiệt khuẩn trong 1 giờ ở 120oC. Sau đó đƣợc tẩm Carrageenin 1% đã pha theo phƣơng pháp nhƣ trên mục 3.3.3.
- Tiến hành:
Tiến hành cấy sợi amiant vào sau gáy trên của mỗi con chuột để gây viêm mạn. Sau khi cấy u hạt, các chuột đƣợc uống nƣớc cất hoặc thuốc thử liên tục trong vòng 7 ngày.
Đến ngày thứ 8, tiến hành giết chuột, bóc tách khối u hạt, đem cân tƣơi. Chọn ngẫu nhiên mỗi lô 3 khối u hạt để làm xét nghiệm giải phẫu bệnh vi thể.
Sau đó khối u đƣợc sấy khô ở nhiệt độ 56o
C trong 18 giờ. Cân trọng lƣợng u hạt sau khi đã đƣợc sấy khô. So sánh trọng lƣợng trung bình của khối hạt giữa các lô uống thuốc và lô chứng. Tác dụng chống viêm đƣợc tính bằng tỷ lệ % giảm trọng lƣợng khối u.
Kết quả_ Nhận xét
+ Tác dụng trên giảm trọng lượng u hạt: thể hiện ở bảng sau
Bảng 3.11. Tác dụng của các thuốc thử lên trọng lƣợng u hạt
Lô Thuốc thử Trọng lƣợng u
(mg) p so lô1 p so lô 2
1 Chứng sinh học 56,23 ± 18,67
2 Prednisolon 10 mg/kg 43,36 ± 7,58 <0,05
3 Cao chiết ethanol liều thấp 38,77 ± 11,73 <0,01 >0,05
4 Cao chiết ethanol liều cao 53,90 ± 18,11 >0,05 >0,05
5 Cao sắc nƣớc liều thấp 40,45 ± 13,49 <0,05 >0,05
Hình 3.8. Biểu đồ thể hiện mức độ ức chế tạo hạt (%) của chế phẩm thử
Kết quả bảng 3.11. và hình 3.8. cho thấy:
Prednisolon liều 10 mg/kg/ngày có tác dụng làm giảm trọng lƣợng khối u hạt so với lô chứng (p< 0,05).
Cao sắc nƣớc liều 3,54g cao/kg TT và 10,62g cao/kg TT đều làm giảm trọng lƣợng khối u hạt so với lô chứng, có tác dụng chống viêm mạn tính (p<0,05), tác dụng này tƣơng đƣơng đƣơng với prednisolon liều 10mg/kg (p>0,05).
Cao chiết ethanol liều thấp 2,11g cao/kg TT làm giảm rõ rệt trọng lƣợng khối u hạt so với lô chứng, có tác dụng chống viêm mạn tính (p<0,01), tác dụng này tƣơng đƣơng với prednisolon liều 10mg/kg (p>0,05).
Cao chiết ethanol liều cao 6,33g cao/kg TT không làm giảm trọng lƣợng khối u hạt so với lô chứng, không có tác dụng chống viêm mạn tính (p>0,05).
+ Kết quả giải phẫu bệnh u hạt trong viêm mạn tính:
Kết quả giải phẫu bệnh đƣợc thể hiện ở bảng sau: 0 5 10 15 20 25 30 35 22.89 31.05 4.14 28.06 23.78 Mứ c độ ứ c ch ế tạo h ạt (% )
Bảng 3.12. Kết quả giải phẫu bệnh
Lô Thuốc thử Kết quả giải phẫu bệnh
1 Chứng sinh
học
Bề mặt là tổn thƣơng loét và hoại tử kèm xâm nhập của nhiều bạch cầu đa nhân trung tính. Có một số dị vật. Hoại tử của bạch cầu đa nhân ở vùng trung tâm của ổ áp xe. Vùng vỏ là mô xơ mạn tính, có ít lympho, tƣơng bào và bạch cầu đa nhân. Các tế bào viêm xâm nhập xuống mô mỡ và mô cơ.
2 Prednisolon
10 mg/kg
Vùng xâm nhập bạch cầu và hoại tử của bạch cầu đa nhân số lƣợng ít trong ổ áp xe, vách là mô hạt có nhiều nguyên bào xơ, bạch cầu đa nhân trung tính. Xâm nhập viêm mạn vào mô mỡ, cơ. Ổ viêm đƣợc khu trú.
3 Cao ethanol
liều thấp
Có hình thành vùng áp xe, mô hạt tạo thành vách áp xe. Có xâm nhập viêm vào mô mỡ và cơ. Ổ tổn thƣơng khu trú.
4 Cao ethanol
liều cao
Có ổ áp xe, có vùng hoại tử, áp xe. Vỏ áp xe là mô xơ có xâm nhập bạch cầu đa nhân. Xâm nhập viêm vào mô mỡ ít.
5 Cao nƣớc
liều thấp
Trung tâm là vùng áp xe – hoại tử, bạch cầu đa nhân. Vỏ áp xe là vỏ xơ có nhiều tế bào xơ non và tế bào viêm. Có xâm nhập viêm vào mô cơ, gồm ít lympho bào và bạch cầu đa nhân.
6 Cao nƣớc
liều cao
Vùng trung tâm là ổ áp xe, có nhiều bạch cầu đa nhân thoái hóa, hoại tử. Vách áp xe là vách xơ có các tế bào xơ, ít tế bào viêm. Các tế bào viêm xâm nhập mô cơ và mô mỡ.